Əsas Fərq – Axın Sitometriyası ilə FACS
Hüceyrə nəzəriyyəsi kontekstində hüceyrələr bütün canlı orqanizmlərin əsas struktur və funksional vahididir. Hüceyrə çeşidlənməsi, müxtəlif hüceyrələri fizioloji və morfoloji xüsusiyyətlərinə görə ayırmaq üçün istifadə edilən bir metodologiyadır. Onlar hüceyrədaxili və ya hüceyrədənkənar xüsusiyyətlərə malik ola bilərlər. DNT, RNT və zülalların qarşılıqlı təsiri hüceyrədaxili interaktiv xüsusiyyətlər, forma, ölçü və müxtəlif səth zülalları isə hüceyrədənkənar xüsusiyyətlər hesab olunur. Müasir elmdə hüceyrə çeşidləmə metodologiyaları bioloji tədqiqatlarda müxtəlif araşdırmalara və həmçinin tibb üzrə tədqiqatlar vasitəsilə yeni prinsiplərin yaradılmasına kömək etmişdir. Hüceyrələrin çeşidlənməsi həm daha az avadanlıqla ibtidai, həm də mürəkkəb texnikanın istifadəsi ilə qabaqcıl texnoloji metodologiyaları əhatə edən müxtəlif metodologiyalar üzrə aparılır. Axın sitometriyası, flüoresan aktivləşdirilmiş hüceyrə çeşidlənməsi (FACS), maqnit hüceyrə seçimi və tək hüceyrə çeşidlənməsi istifadə olunan əsas metodologiyalardır. Hüceyrələri optik xüsusiyyətlərinə görə fərqləndirmək üçün axın sitometriyası və FACS hazırlanmışdır. FACS axın sitometriyasının xüsusi bir növüdür. Axın sitometriyası müxtəlif hüceyrə səthi molekullarına, ölçüsünə və həcminə görə hüceyrələrin heterojen populyasiyasının təhlili zamanı istifadə olunan və tək hüceyrələrin tədqiqinə imkan verən bir metodologiyadır. FACS, hüceyrələrin nümunə qarışığının işığın səpilməsi və flüoresan xüsusiyyətlərinə görə iki və ya daha çox konteynerə çeşidlənməsi prosesidir. Bu, axın sitometriyası ilə FACS arasındakı əsas fərqdir.
Flow Sitometry nədir?
Axın sitometriyası hüceyrədaxili molekulların və hüceyrə səthinin ifadəsini araşdırmaq və təyin etmək və fərqli hüceyrə növlərini təyin etmək və xarakterizə etmək üçün istifadə edilən bir üsuldur. O, həmçinin hüceyrə həcmini və hüceyrə ölçüsünü təyin etmək və təcrid olunmuş subpopulyasiyaların təmizliyini qiymətləndirmək üçün istifadə olunur. Bu, təxminən eyni vaxtda tək hüceyrələrin çox parametrli qiymətləndirilməsinə imkan verir. Axın sitometriyası əlaqəli hüceyrələrə bağlanan zülalları və ya liqandları müəyyən etməyə kömək edən flüoresan etiketli antikorlar sayəsində yaranan flüoresansiyanın intensivliyinin ölçülməsində istifadə olunur.
Şəkil 01: Axın Sitometriyası
Ümumiyyətlə, axın sitometriyasına əsasən üç alt sistem daxildir. Bunlar maye, elektronika və optikadır. Axın sitometriyasında hüceyrə çeşidlənməsi üçün istifadə olunan beş əsas komponent mövcuddur. Bunlar, axın hüceyrəsi (onların nəqli və hüceyrələrin optik algılama prosesi üçün uyğunlaşdırılması üçün istifadə olunan maye axını), ölçmə sistemi (müxtəlif sistemlərdən ola bilər, o cümlədən civə və ksenon lampaları, yüksək güclü su ilə soyudulan və ya aşağı güclü hava ilə soyudulmuş lazerlər və ya diod lazerlər), bir ADC; Analog to Digital Converter sistemi, gücləndirmə sistemi və analiz üçün kompüter. Alma, axın sitometrindən istifadə edərək nümunələrdən məlumatların toplandığı prosesdir. Bu proses axın sitometri ilə əlaqəli kompüter vasitəsilə həyata keçirilir. Kompüterdə mövcud olan proqram, axın sitometrindən kompüterə verilən məlumatları təhlil edir. Proqram həmçinin axın sitometrinə nəzarət edən eksperimentin parametrlərini tənzimləmək qabiliyyətinə malikdir.
FACS nədir?
Flow sitometriyası kontekstində Floresensiya ilə aktivləşdirilmiş hüceyrə çeşidlənməsi (FACS) bioloji hüceyrələrin qarışığının nümunəsinin diferensiallaşdırılması və çeşidlənməsi üçün istifadə edilən bir üsuldur. Hüceyrələr iki və ya daha çox konteynerdən ayrılır. Çeşidləmə üsulu hüceyrənin fiziki xüsusiyyətlərinə əsaslanır, o cümlədən hüceyrənin işığın səpilməsi və flüoresan xüsusiyyətləri. Bu, hər bir hüceyrədən yayılan flüoresan siqnallarının etibarlı kəmiyyət və keyfiyyət nəticələrini əldə etmək üçün istifadə edilə bilən mühüm elmi texnikadır. FACS zamanı əvvəlcə hüceyrələrin əvvəlcədən əldə edilmiş qarışığı; süspansiyon sürətlə axan dar bir maye axınının mərkəzinə yönəldilir. Maye axını, hər bir hüceyrənin diametrinə əsasən süspansiyondakı hüceyrələri ayırmaq üçün nəzərdə tutulmuşdur. Süspansiyon axınına vibrasiya mexanizmi tətbiq edilir və nəticədə fərdi damcılar əmələ gəlir.
Şəkil 02: FACS
Sistem bir hüceyrə ilə tək damcı yaratmaq üçün kalibrlənib. Damcıların əmələ gəlməsindən bir qədər əvvəl, axın süspansiyonu hər bir hüceyrənin flüoresans xüsusiyyətlərini aşkar edən flüoresan ölçmə aparatı boyunca hərəkət edir. Damcıların əmələ gəlməsi nöqtəsində flüoresans intensivliyinin ölçülməsindən əvvəl halqaya bir yük induksiya edilən elektrik yükləyici halqa yerləşdirilir. Damcılar asma axınından əmələ gəldikdən sonra, damcıların içərisində bir yük tutulur və daha sonra elektrostatik əyilmə sisteminə daxil olur. Yükə görə, sistem damcıları müxtəlif qablara yönləndirir. Yükün tətbiqi üsulu FACS-də istifadə olunan müxtəlif sistemlərə görə dəyişir. FACS-də istifadə olunan avadanlıq flüoresanla aktivləşdirilmiş hüceyrə çeşidləyicisi kimi tanınır.
Axın Sitometriyası və FACS arasında oxşarlıq nədir?
Axın sitometriyası və FACS hüceyrələri optik xassələrinə görə fərqləndirmək üçün hazırlanmışdır
Axın Sitometriyası ilə FACS arasındakı fərq nədir?
Flow Sitometry vs FACS |
|
| Axın sitometriyası müxtəlif hüceyrə səthi molekullarına, ölçüsünə və həcminə görə hüceyrələrin heterojen populyasiyasının təhlili zamanı istifadə edilən və tək hüceyrələrin tədqiqinə imkan verən metodologiyadır. | FACS, hüceyrələrin nümunə qarışığının işığın səpilməsi və flüoresan xüsusiyyətlərinə görə iki və ya daha çox konteynerə çeşidlənməsi prosesidir. |
Xülasə – Flow Sitometry vs FACS
Hüceyrə bütün canlı orqanizmlərin əsas struktur və funksional vahididir. Hüceyrə çeşidlənməsi, hüceyrələrin hüceyrədaxili və hüceyrədənkənar xüsusiyyətlərinə görə təcrid olunaraq müxtəlif kateqoriyalara bölünməsi prosesidir. Axın sitometriyası və FACS hüceyrə çeşidləməsində iki vacib metodologiyadır. Hər iki proses hüceyrələri optik xüsusiyyətlərinə görə fərqləndirmək üçün hazırlanmışdır. Axın sitometriyası müxtəlif hüceyrə səthi molekullarına, ölçüsünə və həcminə görə hüceyrələrin heterojen populyasiyasının təhlili zamanı istifadə olunan və tək hüceyrələrin tədqiqinə imkan verən bir metodologiyadır. FACS, hüceyrələrin nümunə qarışığının işığın səpilməsi və flüoresan xüsusiyyətlərinə görə iki və ya daha çox konteynerə çeşidlənməsi prosesidir. Bu, Flow Sitometry və FACS arasındakı fərqdir.
Flow Cytometry vs FACS-in PDF versiyasını endirin
Bu məqalənin PDF versiyasını yükləyə və sitat qeydinə əsasən onu oflayn məqsədlər üçün istifadə edə bilərsiniz. Zəhmət olmasa PDF versiyasını buradan endirin Flow Sitometry və FACS Arasındakı Fərq
