Radioaktiv və qeyri-radioaktiv zondlar arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, radioaktiv zondlar radioaktiv izotoplarla işarələnmiş tək zəncirli DNT və ya RNT ardıcıllığıdır, qeyri-radioaktiv zondlar isə kimyəvi etiket və ya işarə ilə işarələnmiş tək zəncirli DNT və ya RNT ardıcıllığıdır. flüoresan etiket.
Nuklein turşusunun hibridləşdirilməsi molekulyar biologiyada, xüsusilə mikrob diaqnostikasında mühüm texnikadır. Bu, müəyyən bir nuklein turşusu ardıcıllığını müəyyən etməyə və ya aşkar etməyə kömək edir. Bu texnikada nuklein turşuları bərk səthə bərkidilir və zondla hibridləşdirilir. Zond, maraq ardıcıllığını tamamlayan DNT və ya RNT parçasıdır. Nümunədə hədəf ardıcıllığı varsa, zond onunla hibridləşəcək və onu aşkarlanacaq. Radioaktiv və radioaktiv olmayan zondlar kimi iki növ zond var. Buna görə də, biz zondları radioaktiv etiket və ya flüoresan etiketlə işarələyə bilərik.
Radioaktiv zondlar nədir?
Radioaktiv zondlar radioaktiv etiketi olan tək zəncirli DNT və ya RNT fraqmentləridir. Radioaktiv zondların hazırlanmasında radioizotoplardan istifadə olunur. Radioizotoplar 32P, 33P və 35S adətən zondların etiketlənməsi üçün istifadə olunur. Bundan əlavə, 3H və 1251 radioizotopları da zondların etiketlənməsində daha az dərəcədə istifadə olunur. Lakin onlar xüsusi proqramlar üçün istifadə olunur. Müxtəlif radioizotoplar arasında 32P radioaktiv zondların etiketlənməsi üçün ən çox istifadə edilən izotopdur.
Radioaktiv zondlar daha yüksək dərəcədə etibarlılıq və spesifiklik təmin edir. Buna görə də, onlar maksimum həssaslığı təmin edir və hədəf ardıcıllığının dəqiq miqdarını təyin etməyə imkan verir. Bununla belə, radioaktiv zondlarla bağlı bir sıra çatışmazlıqlar var. Onların qısa yarım ömrü var. Bundan əlavə, onlar təhlükəlidirlər və işlənərkən istehsal, istifadə və utilizasiya problemlidir. Bundan əlavə, radioaktiv zond hazırlamaq bahalı prosesdir. Buna görə də, təhlükəsizlik məsələləri və qiymətə görə, radioaktiv zondlar bu gün radioaktiv zondlar kimi istifadə edilmir.
Qeyri-radioaktiv zondlar nədir?
Qeyri-radioaktiv zondlar kimyəvi olaraq etiketlənmiş ikinci tip zondlardır. Digoksigenin radioaktiv olmayan zonddur və antikor əsaslı markerdir. Digoksigenin probları spesifik və həssasdır. Biotin radioaktiv olmayan zondların hazırlanmasında istifadə edilən başqa bir etiketdir. Biotin/Streptavidin və Digoksigenin/Antikor aşkarlama sistemləri hibridləşmədə ən çox istifadə edilən radioaktiv olmayan zondlardır. Bundan əlavə, horseradish peroksidaz sistemi başqa bir radioaktiv olmayan zond sistemidir. Bu qeyri-radioaktiv zondlar hədəf ardıcıllıqla hibridləşdirildikdən sonra onları avtoradioqrafiya və ya digər görüntüləmə üsulları vasitəsilə aşkar etmək olar.
Şəkil 01: Qeyri-radioaktiv zondlarla hibridləşdirmə
Qeyri-radioaktiv zondlar radioaktiv zondlara nisbətən nuklein turşularının hibridləşdirilməsində daha çox istifadə olunur. Bunun səbəbi radioaktiv olmayan zondların təhlükəli materiallarla əlaqəli olmamasıdır. Bundan əlavə, radioaktiv olmayan aşkarlama üsulları hibridləşmə siqnalını aşkar etmək üçün daha qısa məruz qalma vaxtını tələb edir. Bununla belə, radioaktiv olmayan zondlarla DNT hibridləşdirilməsində iştirak edən addımlar adətən yorucu və vaxt aparan olur. Üstəlik, kommersiya həlləri bahalıdır.
Radioaktiv və qeyri-radioaktiv zondlar arasında hansı oxşarlıqlar var?
- Radioaktiv və qeyri-radioaktiv zondlar nuklein turşularının hibridləşdirilməsində istifadə edilən iki növ zonddur.
- Onlar nümunədə hədəf ardıcıllıqlarının aşkarlanmasını asanlaşdırır.
- Hər iki növ zond eyni dərəcədə həssas və spesifikdir.
Radioaktiv və qeyri-radioaktiv zondlar arasındakı fərq nədir?
Radioaktiv zondlar radioaktiv izotoplarla etiketlənmiş tək zəncirli DNT və ya RNT ardıcıllıqlarıdır, qeyri-radioaktiv zondlar isə kimyəvi etiketlə işarələnmiş tək zəncirli DNT və ya RNT ardıcıllığıdır. Beləliklə, bu radioaktiv və radioaktiv zondlar arasındakı əsas fərqdir. Həmçinin, radioaktiv izotoplar təhlükəlidir. Beləliklə, radioaktiv zondlar əhəmiyyətli dərəcədə təhlükəlidir, radioaktiv zondlar isə təhlükəli deyil.
Bundan başqa, radioaktiv və qeyri-radioaktiv zondlar arasındakı digər fərq onların çatışmazlıqlarıdır. Qısa yarı ömrü və onların istehsalı, istifadəsi və atılması ilə bağlı təhlükələr radioaktiv zondlardan istifadənin mənfi cəhətləridir. Digər tərəfdən, radioaktiv olmayan zondlarla DNT hibridləşdirilməsində iştirak edən addımlar adətən yorucu və vaxt aparan olur.
Aşağıda infoqrafika radioaktiv və qeyri-radioaktiv zondlar arasındakı fərqlə bağlı daha çox müqayisə göstərir.
Xülasə – Radioaktiv və Qeyri-radioaktiv Zondlar
Sond maraq ardıcıllığını tamamlayan nukleotid ardıcıllığını ehtiva edən DNT və ya RNT parçasıdır. Hədəf ardıcıllığını aşkar etmək üçün zondlar radioaktiv, flüoresan və ya kimyəvi olaraq etiketlənə bilər. Problar nümunədəki tamamlayıcı ardıcıllıqla bağlanır. Radioaktiv zondlar radioaktiv izotoplarla, qeyri-radioaktiv zondlar isə biotin, digoksigenin və ya horseradish peroksidaza ilə etiketlənir. Beləliklə, radioaktiv və radioaktiv zondlar arasında əsas fərq budur.