Elektroporasiya və mikroinyeksiya arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, elektroporasiya DNT-ni ana hüceyrələrə çatdırmaq üçün yüksək gərginlikli elektrik impulsundan istifadə edən bir texnikadır, mikroinyeksiya isə DNT-ni içəriyə çatdırmaq üçün incə uclu şüşə iynə və ya mikropipetdən istifadə edən bir texnikadır. host hüceyrələri.
Transformasiya yad DNT-nin ana hüceyrələrə köçürülməsi prosesidir. Transformasiya yolu ilə orqanizmin genetik quruluşu dəyişdirilə bilər. Müxtəlif kimyəvi, bioloji və fiziki transformasiya üsulları var. Bəziləri birbaşa, bəziləri isə dolayı üsullardır. Elektroporasiya və mikroinyeksiya birbaşa çevrilmə üsulu olan iki fiziki üsuldur. Elektroporasiya, DNT-ni ana hüceyrələrə daxil etmək üçün bioloji hüceyrə membranlarında mikroskopik məsamələri induksiya etmək üçün elektrik sahəsindən istifadə edir. Mikroinyeksiya isə mikropipet və ya incə uclu şüşə iynədən istifadə edərək birbaşa DNT verir.
Elektroporasiya nədir?
Elektroporasiya DNT-ni bitki hüceyrələrinə və protoplastlara çatdıran transformasiya üsuludur. Bu texnika yüksək gərginlikli elektrik impulsundan istifadə edir. Bitki materialları DNT-yə malik bufer məhlulunda inkubasiya edilir. Sonra məhlul yüksək gərginlikli elektrik impulsuna məruz qalır. Bitki hüceyrə membranlarında yüksək gərginlikli induksiya məsamələri yaranır və bu məsamələr vasitəsilə DNT hüceyrələrin içərisində miqrasiya edir və bitki genomik DNT ilə birləşir. Bu metodun effektivliyi bitki materiallarından və müalicə şəraitindən asılıdır.
Şəkil 01: Elektroporasiya
Transformasiya elektroporasiyadan istifadə edilərkən, hüceyrələrin yalnız 40-50%-i DNT alır. Üstəlik, bu üsulla çevrilmiş hüceyrələrin yalnız 50%-i sağ qala bilir. Bununla belə, bu metodu yerinə yetirmək asandır və hüceyrələrin bioloji quruluşunu və ya funksiyasını dəyişdirmir. Üstəlik, geniş hüceyrələr üçün istifadə edilə bilər.
Mikroinjeksiyon nədir?
Mikroinyeksiya DNT-nin böyük hüceyrələrə daxil edilməsi zamanı xüsusilə faydalı olan transformasiya üsuludur. Bu üsul DNT-ni bitki protoplastlarına və ya heyvan hüceyrələrinə (oositlər, yumurtalar və embrionlar) çatdırmaq üçün incə uclu şüşə iynə və ya mikropipetdən istifadə edir. Əslində bu üsul siçan kimi transgen heyvanların hazırlanması üçün daha uyğundur. Bu üsulda DNT birbaşa nüvəyə və ya sitoplazmaya daxil edilir.
Elektroporasiyaya bənzər, mikroinyeksiya birbaşa transformasiya üsuludur. Mikroinyeksiya xüsusi mikroskop qurğusu altında həyata keçirilir. Pipetin, iynənin, mikroskop səhnəsinin və video texnologiyasının saxlanmasına kompüter nəzarəti bu texnikanın effektivliyini artırmışdır. DNT inyeksiyası zamanı dəyişdirilmiş hüceyrələri asanlıqla müəyyən etmək üçün boya istifadə edilə bilər. Buna görə də transformasiya olunmuş hüceyrələri müəyyən etmək üçün ayrıca üsuldan istifadə etməyə ehtiyac yoxdur. Ən əsası, mikroinyeksiya proseduru marker geni tələb etmir.
Şəkil 02: Mikroinyeksiya
Üstəlik, bu üsul çox təsirli və təkrarlana bilir. Bununla belə, bu üsul bahalı, vaxt aparan və ixtisaslı şəxsi tələb edir. Həmçinin, bu üsulla yalnız az sayda hüceyrə müalicə edilə bilər.
Elektroporasiya və Mikroinyeksiya arasındakı oxşarlıqlar nələrdir?
- Həm elektroporasiya, həm də mikroinyeksiya iki növ transformasiya texnikasıdır.
- Bu üsullar DNT-ni bitki hüceyrələrinə və protoplastlara çatdırır.
- Onlar birbaşa üsullardır.
- Bundan başqa, onlar fiziki və ya mexaniki üsullardır.
- Hər iki üsul transgen bitki və heyvanlar istehsal edərkən faydalıdır.
Elektroporasiya və Mikroinyeksiya Arasındakı Fərq Nədir?
Elektroporasiya texnikası DNT-ni təqdim etmək üçün elektrik sahəsindən istifadə edir, mikroinyeksiya üsulu isə DNT-ni təqdim etmək üçün mikropipet və ya incə uclu şüşə iynədir. Beləliklə, bu elektroporasiya və mikroinyeksiya arasındakı əsas fərqdir. Üstəlik, elektroporasiya daha çox bitki hüceyrələri və protoplastlar üçün, mikroinyeksiya isə daha çox heyvan hüceyrələri üçün istifadə olunur. Bundan əlavə, elektroporasiya mikroinyeksiya qədər vaxt aparan deyil.
Aşağıdakı infoqrafika elektroporasiya və mikroinyeksiya arasındakı fərqləri cədvəl şəklində ümumiləşdirir.
Xülasə – Elektroporasiya və Mikroinyeksiya
Elektroporasiya və mikroinyeksiya gen transferinin iki fiziki üsuludur. Elektroporasiya yüksək gərginlikli elektrik sahəsindən istifadə edir, mikroinyeksiya isə şüşə iynə və ya mikropipetdən istifadə edir. Beləliklə, bu elektroporasiya və mikroinyeksiya arasındakı əsas fərqdir. Bununla belə, hər iki üsul birbaşa ev sahibi hüceyrələrə ekzogen DNT təqdim edir.
