ODS və BDS sütunu arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, ODS sütununda sərbəst –OH funksional qrupları, BDS sütununda isə qeyri-aktivləşdirilmiş –OH qrupları var.
Ters fazalı HPLC, hidrofobik stasionar fazadan istifadə etdiyimiz xromatoqrafik texnikadır. Bu stasionar faza əksər üzvi analitlərin saxlanması üçün yaxşı işləyir. Əks fazalı HPLC-nin mobil fazası qütbdür. Bu xromatoqrafik texnika üçün istifadə olunan müxtəlif növ sütunlar var. ODS və BDS iki belə sütundur.
ODS Sütunu nədir?
ODS sütunu sərbəst –OH funksional qruplarını ehtiva edən əks fazalı HPLC sütununun bir növüdür. O, həmçinin C18 sütunu kimi qısaldılmışdır, çünki tərkibində oktadekasilan zəncirləri var. Bu o deməkdir ki, biz C18 sütununu silisium gel daşıyıcısı ilə kimyəvi cəhətdən bağlanmış oktadesisilil qrupları (bunlar həm də ODS qrupları və ya C18 qrupları kimi adlanır) qablaşdırması ilə doldura bilərik. Bu ODS sütunları xüsusi olaraq tərs fazalı xromatoqrafik üsullar üçün istifadə olunur. Bu sütunlar yüksək nəzəri lövhə nömrəsinə malikdir və eyni zamanda sürətli tarazlıq göstərir. Bu sütunların işləməsi üçün yalnız aşağı qiymət tələb olunduğundan, onlar adətən əks fazalı xromatoqrafiyada istifadə olunur.
Lakin, bu ODS sütunlarının xromatoqrafiyada istifadəsinin bir sıra çatışmazlıqları var. Məsələn, ümumi elüsyon çox sürətlidir, ona görə də qarışıqda bəzi komponentləri ayırmaq çətindir və sütunun sabitləşməsi nisbətən uzun müddət tələb edir.
Şəkil 01: HPLC Sütunu
ODS sütununun kimyəvi strukturunu nəzərdən keçirərkən, onun Si-OH quruluşuna malik olduğu silikagel daşıyıcısının səthinə birləşdirilmiş hidroksil qrupları (-OH) vardır. Bu quruluş "silanol" kimi tanınır. ODS sütun qablaşdırmasında qablaşdırma ODS qruplarını kimyəvi reaksiyalar vasitəsilə silanola bağlamaqla həyata keçirilir. Bu ODS qrupları həcmlidir və yüksək reaktiv deyillər. Buna görə də, bu sütunda çoxlu reaksiyaya girməmiş silanol qrupları mövcuddur. Bununla belə, bu sərbəst silanol analiz zamanı səhvlərə səbəb ola bilər, ona görə də biz bu qrupları böyük olmayan, lakin yüksək reaktiv olan TMS (trimetilsilil) qrupları kimi bəzi digər birləşmələrlə bağlamalıyıq. Bu proses son qapaq adlanır.
BDS Sütunu nədir?
BDS sütunu –OH qruplarını bloklayan əks fazalı HPLC sütununun bir növüdür. Bu o deməkdir ki, bu sütundakı hidroksil qrupları deaktivdir/sərbəst deyil. O, həmçinin BDS C18 sütunu adlanır və bu sütun oktadekasilan zəncirləri ilə doludur. BDS termini Base Deaktivləşdirilmiş Silisium deməkdir. Buna görə də, bu sütunlar son sütunlar kimi də adlandırılır.
Bu sütun xromatoqrafiyada çox vacibdir, çünki onun qalıq silanol qrupları qapaq ilə deaktiv edilir. Beləliklə, minimum qalıq silanol aktivliyi var. Bundan əlavə, bu sütun əsas birləşmələrin təhlili üçün xüsusidir. Burada əsaslar silisium qablaşdırmada olan Si-OH qrupları ilə reaksiya verir. BDS sütunları xromatoqrafiyada əsas problem olan (müəyyən zirvəni tanımaq mümkün olmayan) pik tullantılarını az altmaq üçün nəzərdə tutulub.
ODS və BDS Sütunu Arasındakı Fərq Nədir?
ODS və BDS tərs fazalı xromatoqrafiya üçün istifadə olunan iki sütundur. ODS və BDS sütunu arasındakı əsas fərq, ODS sütununda sərbəst –OH funksional qrupları, BDS sütununda isə qeyri-aktivləşdirilmiş –OH qrupları olmasıdır. Üstəlik, ODS sütunları yüksək pik tullantılara malikdir, BDS sütunları isə pik tullantıları az altmaq üçün nəzərdə tutulub.
Aşağıdakı cədvəl ODS və BDS sütunu arasındakı fərqləri ümumiləşdirir.
Xülasə – ODS və BDS Sütunu
ODS və BDS əks fazalı HPLC üçün istifadə olunan iki sütundur. ODS və BDS sütunu arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, ODS sütununda sərbəst –OH funksional qrupları var, BDS sütununda isə qeyri-aktivləşdirilmiş –OH qrupları var.
