Tökmə lövhəsi ilə Yayılan boşqab arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, nümunənin məlum həcmi yayılmış boşqabda agar mühitinin səthinə yayılır, tökmə boşqabında isə nümunənin məlum həcmi qarışdırılır. agar və sonra boşqaba tökülür. Bu iki texnikanın dəqiqliyini müqayisə edərkən, tökmə lövhəsi yayılan lövhədən daha yüksək dəqiqliyə malikdir.
Standart boşqab sayma üsulu nümunə daxilində yaşayan (böyüyən/becərilə bilən/yaşaya bilən) mikroorqanizmlərin sayını hesablayan böyüməyə əsaslanan yanaşmadır. Bu canlı mikroorqanizmlərin sayını təhlil etmək üçün bir çox mikrobioloji sahədə istifadə olunan güclü bir üsuldur. Qida və süd məhsulları, tibb, ətraf mühit, su və kənd təsərrüfatı, mikrob genetikası, molekulyar mikrobiologiya, böyümə mühitinin inkişafı və Biotexnologiya (bioreaktor texnologiyası, fermentasiya, tullantı/tullantı sularının təmizlənməsi və s.) kimi sahələr bu texnikadan istifadə edir. Bundan əlavə, standart boşqab saymağın iki əsas yolu var: bunlar, Yayılmış boşqab texnikası və Boşqabın Dökülməsi texnikasıdır.
Pour Plate nədir?
Pour plate texnikası nümunədə mövcud olan bəzi canlı hüceyrələri sadalamaq üçün mikrob üsuludur. Dökülmə boşqab metodunun özəlliyi ondan ibarətdir ki, nümunənin məlum həcmi əvvəlcə agar ilə qarışdırılır və sonra boşqaba tökülür.
Şəkil 01: Boşqab
Digər addımlar növbəti hissədə müzakirə olunan yayma lövhəsi texnikasına bənzəyir. Nümunə ilə qarışdırılmış agarı tökdükdən sonra növbəti addım onun bərkiməsinə və inkubasiyasına imkan verməkdir. İnkubasiyadan sonra 1 q və ya 1 ml üçün son CFU-nu hesablamaq üçün canlı koloniyaların sayını hesablamaq vacibdir.
Spread Plate nədir?
Spread lövhəsi nümunədə canlı hüceyrələri sadalamaq üçün bir texnikadır. Bu texnika üçün nümunə üçün ardıcıl seyreltmə lazımdır ki, ən azı birinin sayıla bilən sayda koloniyaya səbəb olmasını təmin etsin. Buradakı proses müəyyən həcmdə seyreltməni agar boşqabının səthinə pipetləmək və onu spirtlə yandırılmış və soyudulmuş bir şüşə yayıcı ilə tez və bərabər şəkildə agarın səthinə yaymaqdır. Etibarlı orta dəyər əldə etmək üçün təkrarların yerinə yetirilməsi lazımdır. Növbəti addım bu boşqabları qısa müddətə qurutmaq, sonra çevirib onları böyümə üçün uyğun temperaturda və müəyyən edilmiş inkubasiya dövrü üçün inkubatora yerləşdirməkdir.
Şəkil 02: Yayılan Plaka
İnkubasiyadan sonra lövhələrin araşdırılması böyüməni göstərəcək. Bir və ya daha çox seyreltmə zamanı inokulyantlarda mövcud olan hüceyrələrin sayı (məsələn, 100 və ya 200 μl) agar səthində 30 ilə 300 arasında diskret koloniyaların yaranmasına səbəb olacaqdır. 30-dan az koloniya sayı statistik cəhətdən etibarsızdır. 300-dən yuxarı olanları sadalamaq çətindir və xətaya meyllidir.
Tökmə boşqabı ilə Yayılan boşqab arasında hansı oxşarlıqlar var?
- Yayılmış boşqab və tökmə boşqabı nümunədə mövcud olan canlı hüceyrələrin sayını əldə etmək üçün iki üsuldur.
- Hər ikisi düz irəliləmə üsullarıdır.
- Nümunə alma xətaları hər iki üsulda baş verə bilər.
- Böyümə şərtlərinin məhdudiyyətləri hər iki metodun nəticələrinə təsir edir.
- Texniki səhvlər də hər iki metodun yekun nəticəsinə mane ola bilər.
- Yaşayışlı olsa da, bu iki üsul kultivasiya oluna bilməyən bakteriyaların yetişdirilməsi üçün istifadə edilmir.
Tökmə qabı ilə Yayılan boşqab arasındakı fərq nədir?
Pour plate nümunədə bir sıra canlı hüceyrələri sadalamaq üçün mikrob üsuludur. Spread plate texnikası medianın səthində böyüyən bakteriyaları sadalamaq üçün başqa bir üsuldur. Boşqab texnikasında proses nümunənin tökmə boşqabındakı bərkimiş mühit səthinə əlavə edilməsindən ibarətdir. Lakin spred boşqab texnikasında proses nümunəni ərinmiş agarla qarışdırmaq və sonra boşqaba tökməkdir.
Bu iki texnikanın dəqiqliyinə gəlincə, tökmə boşqabı yayılan lövhədən daha yüksək dəqiqliyə malikdir. Üstəlik, tökmə boşqabından fərqli olaraq, nümunəni yayılmış boşqabda səthə bərabər şəkildə yaymaq üçün bir şüşə yayıcı istifadə olunur. Bundan əlavə, pour plate istifadə edərək, aerobları, anaerobları və fakultativ anaerobları sadalamaq mümkündür. Bununla belə, yayılmış lövhədən istifadə etməklə yalnız aerobları sadalamaq mümkündür. Bundan əlavə, yayılma boşqabını yerinə yetirmək üçün bərkimiş agar plitələri lazımdır, tökmə üsulu üçün isə maye ərinmiş agar mühiti lazımdır.
Xülasə – Boşqab və Yayılan Plaka
Tökmə lövhəsi və Yayma lövhəsi nümunədə mikrob hüceyrələrinin sayını asanlaşdırmaq üçün mikrobiologiyada iki üsuldur. Hər iki üsul böyüməyə əsaslanır, buna görə də canlı hüceyrələri ölçün. Dökülmə boşqabı zamanı nümunənin məlum həcmi ərimiş agar ilə qarışdırılır və boşqaba tökülür. Yayılan boşqab zamanı bərkimiş agar mühitinin səthinə məlum həcm yayılır. Bu, tökmə boşqabı ilə yayılmış boşqab arasındakı fərqdir.
