Əsas Fərq – RPMI vs DMEM
Tədqiqat işlərinin çoxu heyvan hüceyrəsinin yetişdirilməsini əhatə edir və beləliklə, bu tədqiqatlar xüsusi böyümə şəraitində heyvan hüceyrə xətlərinin saxlanılmasını tələb edir. Heyvan hüceyrələrinin kultivasiyası dərman metabolizmasını müəyyən etmək üçün farmakoloji tədqiqatlarda, xəstəliklərin diaqnostikasında və xərçəng tədqiqatlarında geniş şəkildə həyata keçirilir. Hüceyrə mədəniyyəti mühiti heyvan hüceyrə mədəniyyətinin mühüm aspektidir. Dulbecco-nun Modified Eagle Medium (DMEM) və Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) heyvan hüceyrələrinin yetişdirilməsində istifadə olunan iki mədəniyyət mühitidir. RPMI, süspansiyon mədəniyyətində məməli hüceyrələrini yetişdirmək üçün geniş istifadə olunan bir mediadır. DMEM modifikasiya edilmiş bazal mühit növüdür, amin turşusu və vitamin konsentrasiyaları dörd dəfəyə qədər artır. DMEM, yapışan mədəniyyətlərdə hüceyrələrin yetişdirilməsində istifadə olunur. İki media arasındakı əsas fərq medianın mədəniyyət növüdür. RPMI süspansiyon kulturalarında, DMEM isə yapışan hüceyrələri yetişdirmək üçün istifadə olunur.
RPMI nədir?
RPMI və ya Roswell Park Memorial Institute Medium da RPMI 1640 kimi istinad edilir. Medianın adı medianın kəşf edildiyi institut tərəfindən götürülüb. Bu mühit heyvan hüceyrə mədəniyyətində, xüsusən də məməlilərin hüceyrələrinin böyüməsi üçün istifadə olunur. Onlar əvvəlcə insan limfositlərini böyütmək üçün hazırlanmışdır.
Aşağıdakı maddələr RPMI-ə daxildir.
- Qlükoza
- pH göstəricisi (fenol qırmızısı)\
- Duzlar (natrium xlorid, natrium bikarbonat, disodium fosfat, kalium xlorid, maqnezium sulfat və kalsium nitrat)
- Amin turşuları
- Vitaminlər (i-inositol, xolin xlorid, para-aminobenzoy turşusu, fol turşusu, nikotinamid, piridoksin hidroxlorid, tiamin hidroxlorid, kalsium pantotenat, biotin və riboflavin, siyanokobalamin)
RPMI-nin xüsusi xüsusiyyəti mühitdə fosfat konsentrasiyasının artmasıdır. RPMI 5% Karbon dioksid atmosferində istifadə olunur. Bu, hüceyrə böyüməsi üçün maksimum və optimal şəraiti təmin edəcəkdir. Medianın pH səviyyəsi bikarbonat tamponlama sistemi tərəfindən 8.0 səviyyəsində saxlanılır.
Şəkil 01: Petri qabında hüceyrə mədəniyyəti
Hüceyrə Yetişdirilməsində RPMI tətbiqləri
- İnsan T və B limfositlərinin, sümük iliyi hüceyrələrinin və hibridomanın kultivasiyası.
- İnsan neoplastik hüceyrələrini öyrənmək üçün istifadə olunur.
DMEM nədir?
Dulbecco-nun Modified Eagle's Medium (DMEM) kommersiya məqsədilə hazırlanmış dəyişdirilmiş mühitdir. Orta tozun orijinal teksturası sarıdır. DMEM-də vitamin konsentrasiyası dörd dəfəyə qədər artır və bununla da mühitdəki qida maddəsi artır.
DMEM həmçinin dəmir nitrat, natrium piruvat və serin və qlisin kimi bəzi əsas olmayan amin turşuları kimi daha çox duzların əlavə edilməsi ilə dəyişdirilir. Mediada qlükozanın tərkibi də dəyişdirilir. Orijinal formulasiya 1000 mq/l qlükozadan ibarətdir, halbuki DMEM-də konsentrasiya 4500 mq/l-ə qədər artır. DMEM həmçinin tam mühit olmadığı üçün serum mühitinin əlavə edilməsini tələb edir. Çox vaxt DMEM-ə Fetal Bovine Serum (FBS) əlavə olunur. FBS kultivasiya prosesi üçün tələb olunan zülalları və böyümə faktorlarını təmin edir.
Mühitin pH-ı natrium bikarbonat əlavə edildikdə dəyişir. Natrium bikarbonat əlavə edilməzdən əvvəl mühitin pH-ı 6.80 - 7.40 civarındadır, natrium bikarbonat əlavə edildikdən sonra isə pH 7.60 - 8.20 aralığındadır. Ortanın saxlama temperaturu 2 – 8 0C.
Şəkil 02: DMEM
DMEM Tətbiqləri
- Siçanların embrion hüceyrələrində poliomavirusun lövhə əmələ gətirmə qabiliyyətini öyrənmək üçün.
- Əlaqənin qarşısının alınması tədqiqatlarında.
- Toyuq hüceyrə kulturalarının tədqiqi və təhlilində.
RPMI və DMEM arasında hansı oxşarlıqlar var?
- Həm RPMI, həm də DMEM heyvan hüceyrə mədəniyyətində istifadə olunur.
- Həm RPMI, həm də DMEM mediası maye tərkiblidir.
- Həm RPMI, həm də DMEM mühitində böyümə üçün lazım olan əsas amin turşuları, vitaminlər və qeyri-üzvi duzlar var.
- Həm RPMI, həm də DMEM mediası natamamdır. Buna görə də, serum əlavə edilməlidir.
- Həm RPMI, həm də DMEM mediası karbon mənbəyi kimi qlükozadan istifadə edir.
- Həm RPMI, həm də DMEM mediası daha yüksək pH-a malikdir.
RPMI və DMEM arasındakı fərq nədir?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI süspansiyon kulturasında məməlilərin hüceyrələrini yetişdirmək üçün geniş istifadə olunan mühitdir. | DMEM artan amin turşusu və vitamin konsentrasiyası ilə dəyişdirilmiş bazal mühit növüdür. |
| Əlavə Fosfatların Varlığı | |
| RPMI-də təqdim olunur. | DMEM-də yoxdur. |
| İstifadə edin | |
|
Yapışan mədəniyyətlərdə hüceyrələrin yetişdirilməsi üçün istifadə olunur.üçün istifadə olunur
|
| Mədəniyyət növləri | |
| RPMI suspenziya kulturaları üçün istifadə olunur. | DMEM hüceyrə yapışdırılmış kulturalar üçün istifadə olunur. |
Xülasə – RPMI vs DMEM
Həm RPMI, həm də DMEM heyvan hüceyrəsinin kultivasiyasında, xüsusən də in vitro limfositlər də daxil olmaqla heyvan hüceyrə xətlərinin yetişdirilməsi üçün geniş istifadə olunur. DMEM, artan qida konsentrasiyasının olduğu dəyişdirilmiş bazal mühitdir. RPMI Roswell Park Memorial İnstitutu tərəfindən hazırlanmışdır və o, həmçinin heyvan hüceyrəsinin kultivasiyasında xüsusilə məməli limfositləri üçün istifadə olunan bir mühitdir. Hər iki media kommersiya baxımından mövcuddur. Bu, RPMI və DMEM arasındakı fərqdir.
