Əsas Fərq – Qram Ləkəsi vs Acid Fast
Bakteriyalar çox kiçik mikroorqanizmlərdir. Onlar şəffafdır və yaşayış və ləkəsiz şəraitdə aşkarlanması çətindir. Beləliklə, bakteriya aşkarlanmasını asanlaşdırmaq üçün müxtəlif rəngləmə üsulları hazırlanır. Boyama texnikasının üç əsas növü var: sadə boyama, diferensial boyama və struktur boyanma. Diferensial boyama bakteriyaları fərqləndirmək üçün birdən çox ləkədən istifadə edən bir üsuldur. Qram boyası və turşuya davamlı ləkə ən çox diferensial ləkələr kimi tanınır. Qram boyama bakteriyaları qram-müsbət bakteriyalar və qram-mənfi bakteriyalar kimi tanınan iki qrupa ayıran diferensial boyama üsuludur. Turşuya davamlı ləkə, turşuya davamlı orqanizmlərdən Mikobakterium kimi turşuya davamlı orqanizmləri müəyyən etmək üçün istifadə edilən diferensial ləkədir. Bu, Qram boyası ilə Acid Fast ləkəsi arasındakı əsas fərqdir.
Qram ləkəsi nədir?
Qram ləkəsi mikrobiologiyada bakteriya identifikasiyası üçün istifadə edilən mühüm diferensial rəngləmə üsuludur. Bu texnika 1884-cü ildə Danimarkalı Bakterioloq Hans Kristian Qram tərəfindən təqdim edilmişdir. Qram boyama bakteriyaları qram-müsbət və qram-mənfi adlandırılan iki əsas qrupa ayırır ki, bunlar bakteriya təsnifatı və identifikasiyasında çox vacibdir. Mikrobioloqlar tədqiqatları zamanı bakteriya xarakteristikasında ilkin addım olaraq qram boyama həyata keçirirlər.
Bakteriyalar hüceyrə divarındakı fərqlərə görə qruplaşdırılır. Qram-müsbət bakteriyalar hüceyrə divarında qalın peptidoqlikan təbəqəsindən, qram-mənfi bakteriyalar isə hüceyrə divarında nazik peptidoqlikan təbəqəsindən ibarətdir. Qram boyamasının nəticəsi hüceyrə divarının peptidoqlikan təbəqəsinin qalınlığındaki fərqə əsaslanacaqdır.
Qram boyama dörd müxtəlif reagentdən istifadə etməklə həyata keçirilir, yəni; ilkin ləkə, mordan, rəngsizləşdirici və əks ləkə. Kristal bənövşəyi və safranin müvafiq olaraq əsas və əks ləkə kimi, qram yod və 95% spirt isə rəngləndirici və rəngsizləşdirici olaraq istifadə olunur. Qram ləkəsinin əsas addımları aşağıdakılardır;
- Bakteriya yaxması təmiz şüşə slaydda hazırlanır, istiliklə sabitlənir və soyudulur.
- Yaxma 1 – 2 dəqiqə ərzində kristal bənövşəyi ilə sulanır.
- Smear artıq ləkələri çıxarmaq üçün yavaş axan kran suyu ilə yuyulur.
- Qram yod yaxma üzərinə 1 dəqiqə çəkilir.
- Smear yavaş axan kran suyu ilə yuyulur
- Yaxma 2 – 5 saniyə ərzində 95% spirt ilə yuyulur və yavaş axan kran suyu ilə yuyulur.
- Smear 1 dəqiqə ərzində safraninlə əks ləkələnir
- Yaxma yavaş axan kran suyu ilə yuyulur, qurudulur və mikroskop altında müşahidə edilir.
Qram ləkəsinin sonunda qram-mənfi bakteriyalar çəhrayı rəngdə, qram-mənfi bakteriyalar isə bənövşəyi rəngdə müşahidə olunacaq.
Şəkil 01: Qram-mənfi və Qram-müsbət bakteriyalar
Qram ləkəsinin nəticəsi onların hüceyrə divarındakı peptidoqlikan təbəqəsinin qalınlığı ilə müəyyən edilir. Rəngsizləşdirmə mərhələsi zamanı ilkin ləkə və mordan qram-mənfi bakteriyalardan asanlıqla çıxarılır və nazik peptidoqlikan qatına malik olduqları üçün rəngsiz olurlar. Əsas ləkə qram-müsbət bakteriyalarda saxlanılır, çünki onların qalın peptidoqlikan təbəqəsi var. Əsas ləkənin saxlanması səbəbindən əks ləkə qram-müsbət bakteriyalar üçün təsirli olmayacaq. Beləliklə, qram müsbət bakteriyalar ilkin ləkə rəngində, yəni bənövşəyi rəngdə görünəcək. Əks ləkə qram-mənfi bakteriyaları ləkələyəcək və onlar safranin rəngi olan seçilmiş rəngdə görünəcəklər. Beləliklə, bakteriyaları qram ləkəsinə görə iki qrupa bölmək asandır və bakterial differensiasiya və identifikasiyada dəyərlidir.
Acid Fast nədir?
Turşuya davamlılıq müəyyən bakteriyaların fiziki xüsusiyyətidir, xüsusən də onların rəngləmə prosedurları zamanı turşuların rəngsizləşdirməyə qarşı müqavimətidir. Ləkələndikdən sonra bu orqanizmlər bir çox rəngləmə protokollarında ümumi olan seyreltilmiş turşu və ya etanol əsaslı rəngsizləşdirmə prosedurlarına müqavimət göstərir. Beləliklə, həmin orqanizmlərə “turşu orucu” adı verilmişdir. Bu xüsusiyyət onların hüceyrə divarlarında yüksək səviyyədə mumlu materialın (mikolik turşular) olması ilə göstərilir. Bu test Mycobacterium tuberculosis-in müəyyən edilməsi üçün vacibdir.
Şəkil 2: Turşu Sürətli Mikobakteriyalar
Bu turşuya sürətli ləkə 1882-ci ildə Paul Ehrlich tərəfindən hazırlanmışdır. Erlixin turşuya sürətli texnikası Ziehl-Neelsen tərəfindən dəyişdirilmiş və indi daha tez-tez istifadə olunur. Turşu sürətli boyama proseduru üç müxtəlif reagentdən ibarətdir. Əsas ləkə kimi karbol fuşin istifadə olunur. Turşu spirti rəngsizləşdirici vasitə kimi istifadə olunur. Metilen mavisi əks ləkə kimi istifadə olunur. Boyanma proseduru aşağıdakı kimi həyata keçirilir.
- Slayddakı sabit nümunəyə əsas ləkə (karbol fuksin) tətbiq olunur (Bütün hüceyrələr qırmızı rəngə boyanacaq).
- Slayd 5 dəqiqə buxarlanaraq qızdırılır ki, bu da ləkələri düzgün şəkildə hüceyrələrə aparır.
- Sonra rəngsizləşdirici məhlul əlavə edilir (Bu, turşuya davamlı bakteriyalardan başqa bütün hüceyrələrdən qırmızı boyanı çıxarır).
- Metilen mavisi əks ləkə kimi əlavə olunur (Bütün rəngsiz bakteriya hüceyrələrini rəngləndirir).
- Turşu sürətli bakteriyalar qırmızı qalır, turşu olmayan bakteriyalar isə mavi rəngə boyanır.
Qram ləkəsi və turşu tezliyi arasında hansı oxşarlıqlar var?
- Qram ləkəsi və Acid fast iki fərqli rəngləmə üsuludur.
- Hər iki üsul bakteriyaları iki qrupa ayırır.
- Hər iki texnikada iki ləkə və bir rəngsizləşdirmə istifadə olunur.
Qram ləkəsi ilə turşu tezliyi arasındakı fərq nədir?
Qram Ləkəsi vs Acid Fast |
|
| Qram boyama differensial rəngləmə üsuludur və bakteriyaları iki qrupa qram-müsbət və qram-mənfi bakteriyalara ayırır. | Acid Fast ləkəsi turşuya davamlı olmayan orqanizmlərdən turşuya davamlı orqanizmləri müəyyən etmək üçün istifadə edilən diferensial ləkədir. |
| İlkin Ləkə | |
| Kristal bənövşəyi qram boyamada çox istifadə edilən əsas ləkədir. | Karbol fuksin turşu tezliyində istifadə edilən əsas ləkədir. |
| Rəngsizləşdirici agent | |
| 95% spirt qram ləkəsində rəngsizləşdirici vasitə kimi istifadə olunur. | Turşu spirti sürətli turşuda rəngsizləşdirici vasitə kimi istifadə olunur. |
| Əks ləkəsi | |
| Qram ləkəsi əks ləkə kimi safranindən istifadə edir. | Turşu sürətli ləkə əks ləkə kimi metilen mavisindən istifadə edir. |
| Müşahidə | |
| Qram mənfi bakteriyalar seçmə rəngdə, qram müsbət bakteriyalar isə bənövşəyi rəngdə müşahidə olunur. | Turşu Sürətli bakteriyalar qırmızı rəngdə, turşu olmayan bakteriyalar isə mavi rəngdə müşahidə edilir. |
Xülasə – Qram Ləkəsi vs Acid Fast
Mikroorqanizmlərin canlı vəziyyətdə vizuallaşdırılması çətindir. Buna görə də, bioloji ləkələr və boyanma prosedurları onların xüsusiyyətlərini öyrənmək üçün geniş şəkildə istifadə olunur. Diferensial boyanma bakteriyaları fərqləndirmək üçün istifadə edilən rəngləmə texnikasının bir növüdür. Qram boyası və turşuya sürətli ləkə iki fərqli rəngləmə üsuludur. Qram boyama qram-mənfi bakteriyaları və qram-müsbət bakteriyaları hüceyrə divarlarının qalınlığına görə fərqləndirir. Turşu sürətli boyanma, hüceyrə divarındakı mikolik turşunun tərkibinə əsaslanaraq turşuya sürətli bakteriyaları turşuya davamlı olmayan bakteriyalardan fərqləndirir. Bu, sürətli turşu ilə qram ləkəsi arasındakı fərqdir.
Gram Stain vs Acid Fast-ın PDF versiyasını endirin
Bu məqalənin PDF versiyasını yükləyə və sitat qeydinə əsasən onu oflayn məqsədlər üçün istifadə edə bilərsiniz. Lütfən, PDF versiyasını buradan yükləyin Gram ləkəsi və turşu sürəti arasındakı fərq.
