İmmunoprecipitation və koimmunoprecipitation arasında əsas fərq immunoprecipitation spesifik bir antikor istifadə edərək, məhluldan bir zülal çökdürən bir texnikadır, koimmunoprecipitation isə xüsusi bir antikor istifadə edərək məhluldan bütöv protein komplekslərini çökdürən bir texnikadır.
Antigen-antikor qarşılıqlı təsiri immun reaksiya zamanı B hüceyrələri tərəfindən istehsal olunan antikorlar və antigenlər (zülallar) arasında spesifik kimyəvi qarşılıqlı əlaqədir. Normalda, həll olunan antigenlər həll olunmayan görünən kompleks yaratmaq üçün həll olunan temperaturda və pH-da bir elektrolitin iştirakı ilə həll olunan antikorlarla birləşir. Buna yağış reaksiyası deyilir. Buna görə də, immunoprecipitation və coimmunoprecipitation antigenlər kimi zülalları müəyyən etmək üçün laboratoriyalarda müntəzəm olaraq istifadə edilən iki növ çökmə reaksiyasıdır.
İmmunoprecipitation nədir?
İmmunoprecipitation spesifik antikordan istifadə edərək məhluldan zülalın çökdürülməsi üsuludur. Bəzən bu üsul fərdi protein immunoprecipitation kimi də tanınır. İmmunopresipitasiya seçilmiş bir proteini hüceyrə lizatından təcrid etmək üçün antikordan istifadə edir. Antikor öz xüsusi hədəf zülalını və ya antigeni qarışıqdan təmizləyir. Antikor zülala bağlanır və antikor-antigen kompleksi nümunədən çıxarılır. Eksperimental quraşdırmada, antigen-antikor kompleksi protein A/G birləşdirilmiş agaroza və ya maqnit muncuqlardan istifadə edərək çıxarılır. Daha sonra muncuqlar yuyulur və maraq doğuran zülal süzülür. İmmunopresipitasiya ilə əldə edilən təmizlənmiş zülal və ya antigen fermentlə əlaqəli immunosorbent analizi (ELISA) və western blot (WB) kimi müxtəlif üsullarla təsdiqlənir.
Şəkil 01: İmmunoprecipitation
Bundan əlavə, təcrid olunmuş zülallar və ya antigenlər ilkin ardıcıllığa əsaslanan enzimatik həzm nümunələrindən istifadə etməklə kütləvi spektrometriya vasitəsilə kəmiyyətcə müəyyən edilə və müəyyən edilə bilər. İmmunopresipitasiya sınağına başlamazdan əvvəl müəyyən mülahizələr var: metod formatının seçimi, zülalların və muncuqların bağlanması, düzgün əsas antikor və izotipin seçilməsi və mənfi nəzarət.
Koimmunoprecipitation nədir?
Koimmunoprecipitation spesifik antikordan istifadə edərək məhluldan bütöv protein komplekslərinin çökdürülməsi üsuludur. Koimmunopresipitasiya ümumiyyətlə daha böyük zülallar kompleksinin üzvü olduğu güman edilən məlum zülalı (antigen) hədəf alan spesifik antikor seçməklə işləyir. Məlum üzvü müəyyən bir antikorla hədəf alaraq, bütün protein kompleksini məhluldan çıxarmaq mümkündür. Bu, kompleksin naməlum üzvlərini müəyyən etməyə imkan verir. Zülal komplekslərinin məhluldan çıxarılması konsepsiyasına bəzən “aşağıya çəkilmə” mexanizmi deyilir.
Şəkil 02: B Koimmunopresipitasyon
Koimmunoprecipitation zülal-zülal qarşılıqlı təsirini təhlil etmək üçün istifadə edilən güclü texnikadır. Koimmunopresipitasiyanın əsas məqsədi liqandlar, kofaktorlar və ya siqnal molekulları kimi qarşılıqlı təsir göstərən tərəfdaşların maraq doğuran zülalın müəyyən edilməsidir. Bundan əlavə, koimmunoprecipitation zülalları serumdan, hüceyrə lizatından, homogenləşdirilmiş toxumadan və ya kondisioner mühitdən ayırmaq üçün istifadə olunan effektiv bir texnikadır.
İmmunoprecipitation və Coimmunoprecipitation Arasındakı oxşarlıqlar nələrdir?
- İmmunoprecipitation və coimmunoprecipitation iki növ çökmə reaksiyasına əsaslanan texnikadır.
- Hər iki üsul xüsusi antikor vasitəsilə hədəf antigeni müəyyən etmək üçün istifadə edilə bilər.
- Hər iki üsul antigen-antikor qarşılıqlı təsirindən çox asılıdır.
- Onlar müntəzəm olaraq kliniki laboratoriyalarda istifadə olunur.
İmmunoprecipitation və Coimmunoprecipitation Arasındakı Fərq Nədir?
İmmunoprecipitation spesifik antikordan istifadə edərək məhluldan zülal çökdürən bir texnikadır, koimmunoprecipitation isə spesifik antikordan istifadə edərək məhluldan bütöv protein komplekslərini çökdürən bir üsuldur. Beləliklə, bu, immunoprecipitation və coimmunoprecipitation arasındakı əsas fərqdir. Bundan əlavə, immunopresipitasiyadan laboratoriyalarda daha çox istifadə olunur, koimmunopresipitasiya isə laboratoriyalarda çox istifadə olunmur.
Aşağıdakı infoqrafika immunoprecipitation və koimmunoprecipitation arasındakı fərqləri yan-yana müqayisə üçün cədvəl şəklində təqdim edir.
Xülasə – İmmunoprecipitation vs Coimmunoprecipitation
İmmunoprecipitation və coimmunoprecipitation antigen-antikor qarşılıqlı təsirindən asılı olan iki növ çökmə reaksiyasına əsaslanan üsullardır. İmmunopresipitasiya texnikası xüsusi antikordan istifadə edərək məhluldan zülal çökdürür, koimmunopresipitasiya texnikası isə xüsusi antikordan istifadə edərək məhluldan bütöv protein komplekslərini çökdürür. Beləliklə, bu, immunoprecipitation və coimmunoprecipitation arasındakı fərqi ümumiləşdirir.
