Kolorimetrik və flüorometrik analiz arasında əsas fərq ondan ibarətdir ki, kolorimetrik analiz məhluldakı rəngli birləşmələrin konsentrasiyasını, flüorometrik analiz isə məhlulun kinetik mexanizmini müəyyən edir.
Biokimyəvi analiz bioloji molekulun və ya maddənin aktivliyini analitik olaraq aşkar edən və ya kəmiyyətini təyin edən texnikadır. Bu, in vitro prosesdir. Kolorimetrik analiz və florometrik analiz laboratoriyalarda aparılan ümumi biokimyəvi analizlərin iki növüdür. ELISA və western blotting kimi çoxsaylı üsullar həm də metabolik aktivliyin kəmiyyətinin müəyyən edilməsi və zülallar, fermentlər və digər kiçik molekullar kimi biomolekulların funksional davranışının ölçülməsi üçün kompleks biokimyəvi analizlərdir. Bu tip analizlər zülal-DNT, zülal-RNT və zülal-zülal qarşılıqlı təsirlərinin müəyyən edilməsi üçün istifadə olunur.
Kolorimetrik Təhlil nədir?
Kolorimetrik analiz məhluldakı rəngli birləşmələrin konsentrasiyasını təyin edən üsuldur. Başqa sözlə, kolorimetrik analiz reagentlər və analitlər arasında fermentativ və ya kimyəvi reaksiya nəticəsində rəng dəyişikliyinə səbəb olan reaksiyadır. Kolorimetrik analizlər biokimyada fermentləri, spesifik birləşmələri, hormonları, antikorları və digər analitləri yoxlamaq üçün tətbiq olunur. Onlar kolorimetrlərdən və ya spektrofotometrlərdən istifadə edirlər. Kolorimetrlər rəng xüsusiyyətlərinin obyektiv ölçülməsini təmin etmək üçün rəngli nümunələri xarakterizə edən alətlərdir. Spektrofotometr işığın rəngindən və ya dalğa uzunluğundan asılı olaraq işığın intensivliyini ölçən cihazdır.
Şəkil 01: Kolorimetrik Təhlil
Kolorimetrik Təhlil Necə İşləyir?
Kolorimetrik analizdə boşqab quyulara bağlanmış xüsusi antikorla hazırlanır. Sonra nümunə əlavə olunur. Bu, nümunənin antikorla bağlanmasına imkan verə bilər. Sonra aşkarlama zondu ilə reaksiya vermək üçün quyulara aşkarlama antikoru və substrat əlavə edilir. Stop məhlulu oxumadan əvvəl sonunda əlavə edilir. Boş adlanan boş quyu nümunəsiz qalır. Kolorimetrik analizdə rəng nə qədər tünd olarsa, analitin konsentrasiyası bir o qədər çox olar. Adətən oxumaq üçün yalnız bir dalğa uzunluğu lazımdır. Lakin istinad ölçmə varsa, iki və ya daha çox dalğa uzunluğu istifadə olunur.
Fluorometrik Təhlil nədir?
Flüorometrik analiz ferment reaksiyalarının kinetik mexanizmini təyin edən bir texnikadır. Florometrik analiz flüoresan olmayan substratdan flüoresan məhsulun əmələ gəlməsi ilə və ya əksinə baş verir. Bu analiz həmçinin flüoresan rezonans enerji ötürülməsindən (FRET) istifadə edir, burada enzimatik reaksiya substratda iki flüoroforun mövqeyini dəyişir, beləliklə, flüoresans intensivliyi dəyişir.
Şəkil 02: Florometrik Təhlil
Flüorometrik analizlər ümumiyyətlə digər analizlərə nisbətən daha həssasdır. Xəstələrin toxuma, hüceyrə və ya maye nümunələrində diaqnostik ferment təxminləri yüksək həssaslığa görə artır.
Flüorometrik Təhlil Necə İşləyir?
Flüorometrik analizdə boşqabdakı nümunəyə substrat əlavə edilir və lövhə oxuyucusu vasitəsilə flüoresan reaksiyası alınır. Burada hər bir hüceyrə ayrıca ölçülür. Flüorometrik analizlərdə qeyri-şəffaf lövhələrdən istifadə olunur. Bu, işığın səpilməsini azaldır. Bu tip analiz üçün iki dalğa uzunluğu lazımdır. Bir dalğa uzunluğu həyəcanı aşkar etmək üçün, digər dalğa uzunluğu isə emissiya üçündür.
Kolorimetrik və Flüorometrik Təhlil Arasındakı oxşarlıqlar nələrdir?
- Kolorimetrik analiz və florometrik analiz iki növ biokimyəvi analizdir.
- Hər iki analiz tibbi diaqnostika üçün aparılır.
- Bu analizlər enzimatik reaksiya ehtiva edir.
- Hər iki analizdə substrat və analitlər var.
Kolorimetrik və Flüorometrik Təhlil Arasındakı Fərq Nədir?
Kolorimetrik analiz məhluldakı rəngli birləşmələrin konsentrasiyasını təyin edən texnikadır, florometrik analiz isə ferment reaksiyalarının kinetik mexanizmini təyin edən bir üsuldur. Beləliklə, bu kolorimetrik və flüorometrik analiz arasındakı əsas fərqdir. Bundan əlavə, florometrik analizlər kolorimetrik analizlərdən daha həssasdır; beləliklə, flüorometrik analizlər daha çox analiti aşkar etmək qabiliyyətinə malikdir. Beləliklə, bu kolorimetrik və flüorometrik analiz arasındakı başqa bir vacib fərqdir. Bundan əlavə, florometrik analizlər iki dalğa uzunluğu tələb edir, kolorimetrik analizlər isə bir dalğa uzunluğu ilə həyata keçirilir.
Aşağıdakı infoqrafikada kolorimetrik və flüorometrik analiz arasında daha çox fərq göstərilir.
Xülasə – Kolorimetrik və Flüorometrik Təhlil
Biokimyəvi analiz hüceyrə metabolik reaksiyalarını təyin etmək və kəmiyyətini təyin etmək üçün istifadə edilən analitik prosesdir. Kolorimetrik analiz və florometrik analiz iki növ biokimyəvi analizdir. Kolorimetrik analiz reagentlər və analitlər arasında fermentativ və ya kimyəvi reaksiya nəticəsində rəng dəyişikliyinə səbəb olan reaksiyadır, fluorometrik analiz isə ferment reaksiyalarının kinetik mexanizmini təyin etmək üçün istifadə edilən bir üsuldur. Hər iki analiz substrat və analiti əhatə edən enzimatik reaksiyadan asılıdır. Florometrik analizlər kolorimetrik analizlərə nisbətən daha həssasdır. Ən əsası, florometrik analizlər iki dalğa uzunluğu tələb edir, kolorimetrik analizlər isə yalnız bir dalğa uzunluğu ilə həyata keçirilə bilər. Beləliklə, bu, kolorimetrik və flüorometrik analiz arasındakı fərqi ümumiləşdirir.
