Radioimmunoassay ilə immunoradiometrik analiz arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, radioimmunoanalizdə ölçüləcək nümunə və ya birləşmə birləşmədən əvvəl radioaktiv antigenlə birləşdirilir, immunoradiometrik analizdə isə nümunə və ya birləşmə dərhal radioaktiv etiketli ilə birləşir. antikorlar.
İmmunoassay bir antikor və ya antigendən istifadə edərək məhlulda makromolekulların varlığını və ya konsentrasiyasını aşkar edən biokimyəvi testdir. Nümunədə antigenləri ölçmək üçün flüoresan və radioaktiv antikorlar istifadə olunur. Əvvəlcə antikorlar zərdab zülalının təhlili üçün immunoprecipitation, immunodiffusion və immun-elektroforez kimi çökmə üsullarında istifadə edilmişdir. Hazırda dərmanların, şiş markerlərinin və hormonların ölçülməsi üçün radioimmunoassay və immunoradiometrik analizlər kimi yüksək həssas üsullardan istifadə olunur.
Radioimmunoassay Təhlili nədir?
Radioimmunoassay (RIA) radioaktiv elementlərdən istifadə edərək antigen-antikor komplekslərinin mərhələli formalaşdırılmasından istifadə edən immunoanalizdir. RİA adətən nümunədə antigenin miqdarını aşkar etmək üçün radioaktiv antikorlardan istifadə edir. RİA çox spesifik və yüksək həssas in vitro analizdir. RİA-nın arxasında duran prinsip rəqabətli məcburidir. Burada radioaktiv antigen qeyri-radioaktiv antigenlə sabit miqdarda antikor və ya reseptor bağlama yerləri üçün rəqabət aparır. RİA radioaktiv maddələrdən istifadə edildiyi üçün xüsusi lisenziya və ehtiyat tədbirləri tələb edir və o, ən ucuz üsullar arasında qalır.
Şəkil 01: İmmunoanaliz
RİA zamanı məlum miqdarda antigen tez-tez tirozinə birləşdirilmiş yodun qamma-radioaktiv izotopları ilə etiketlənərək radioaktiv hala gətirilir. Sonra bu antigen məlum miqdarda antikorla birləşdirilir. Burada həm antigen, həm də antikor xüsusi olaraq bir-birinə bağlanır. Sonra, xüsusi antikorlarla zərdabda etiketli antigenlər və etiketlənməmiş antigenlər arasında rəqabətli reaksiyaya başlamaq üçün qan zərdab nümunəsi əlavə edilir. Bu reaksiyada antikorlar müəyyən miqdarda etiketlənmiş antigen buraxır. Bu miqdar etiketli və etiketsiz antigen nisbətinə mütənasibdir. Nəhayət, xəstənin qan serumunda antigen miqdarını əldə etmək üçün bağlama əyrisi yaradılır.
İmmunoradiometrik Təhlil nədir?
İmmunoradiometrik analiz (IRMA) radio ilə işarələnmiş antikorlardan istifadə edən immunoanalizdir. IRMA-da antikorlar radioizotoplardan istifadə edərək etiketlənir. Bu antikorlar müəyyən bir nümunədə mövcud olan antigenlərə bağlanır. Müsbət bir nümunədə radioaktiv olaraq etiketlənmiş antikorlar antigenlərin sərbəst epitoplarına bağlanır. Bu, antigen-antikor kompleksi əmələ gətirir.
İkinci reaksiya zamanı bağlanmamış etiketli antikorlar bərk faza antigenindən istifadə edilərək çıxarılır. Məhlulda qalan radioaktiv antikorların sayı antigen konsentrasiyasının birbaşa funksiyasıdır. IRMA, reagent kimi həddindən artıq miqdarda radio ilə işarələnmiş antikorun istifadə edildiyi artıq reagent analizi kimi tanınır. Burada etiketli antikor və ya antigenin həddindən artıq konsentrasiyası reaksiya verməyə icazə verilir. Son addım olaraq, antigenə bağlı və sərbəst antikorlar ayrılır və antigenlə bağlı fraksiya radioaktiv analizlərə məruz qalır. Burada fraksiyanın fəaliyyəti antigenin konsentrasiyası ilə düz mütənasibdir.
Radioimmunoassay və İmmunoradiometrik Təhlil arasında hansı oxşarlıqlar var?
- Həm radioimmunoassay, həm də immunoradiometrik analiz antigen-antikor komplekslərinin mərhələli formalaşdırılmasında radioaktiv elementlərdən istifadə edən immunoanalizlərdir.
- Onlar antigen-antikor kompleksi əmələ gətirirlər.
Radioimmunoassay və İmmunoradiometrik Təhlil Arasındakı Fərq Nədir?
Radioimmunoassay, radioizotopla etiketlənmiş antigenlə antikor səviyyələrini təyin edən immunoanalizdir, immunoradiometrik analiz isə radioaktiv işarəli antikorun həddindən artıq konsentrasiyasından istifadə edən artıq reagent analizidir. Beləliklə, bu radioimmunoassay və immunoradiometrik analiz arasındakı əsas fərqdir. IRMA RİA-dan daha yüksək həssaslıq təmin etməyə qadirdir. RİA-da antigenlər yodun qamma-radioaktiv izotopları ilə, IRMA antikorlarında isə yodun izotoplarından istifadə etməklə etiketlənir. Beləliklə, bu həm də radioimmunoassay və immunoradiometrik analiz arasındakı fərqdir. IRMA artıq reagent texnikası olduğundan, analiz RIA-dan daha qısa müddətdə həyata keçirilir.
Aşağıdakı cədvəl radioimmunoassay və immunoradiometrik analiz arasındakı fərqləri ümumiləşdirir.
Xülasə – Radioimmunoassay vs İmmunoradiometrik Təhlil
Radioimmunoassay antikor səviyyələrini təyin etmək üçün mərhələli formalaşmada radioaktiv elementlərdən istifadə edən immunoanalizdir. RİA adətən radioaktiv antikorlardan istifadə edir. Bir radioaktiv antigen qeyri-radioaktiv antigenlə sabit miqdarda antikor və ya reseptor bağlama yerləri üçün rəqabət aparır. İmmunoradiometrik analiz radioaktiv etiketli antikorlardan istifadə edərək nümunənin antigen səviyyələrini təyin etmək üçün aparılan immunoanalizdir. Bu antikorlar müəyyən bir nümunədə mövcud olan antigenlərə bağlanır. Hər analizin sonunda bir antigen-antikor kompleksi əmələ gəlir. Təhlillərin nəticələrini əldə etmək üçün bağlama əyrisi çəkilir. Radioimmunoassayda etiketlənmiş antigenin miqdarı etiketlənmiş və etiketlənməmiş antigen nisbətinə mütənasibdir, lakin immunoradiometrik analizdə antigenlə əlaqəli fraksiyanın fəaliyyəti antigenin konsentrasiyası ilə düz mütənasibdir. Bu radioimmunoassay və immunoradiometrik analiz arasındakı fərqin xülasəsidir.
