İzokratik və qradient elüsyon arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, izokratik elüsyon mobil fazada sabit konsentrasiyanın saxlanmasına, qradient elüsyon isə mobil fazada dəyişən konsentrasiyanın saxlanmasına aiddir.
Xromatoqrafiyada izokratik və qradient elüsyon terminləri istifadə olunur. Xromatoqrafik qaçış zamanı biz hərəkətsiz bir maddə olan stasionar fazadan, hərəkətli fazadan, hərəkət edən maddədən istifadə edirik. İzokratik və qradient elüsyon mobil fazanın xüsusiyyətlərini təsvir edir.
İzokratik Elüsyon nədir?
İsokratik elüsyon mobil fazanın sabit konsentrasiyası olduqda xromatoqrafiyada istifadə olunan termindir. Burada mobil fazanın konsentrasiyası xromatoqrafik proses boyu sabitdir. Bu prosesdə xromatoqramda xətti olaraq tutma müddəti ilə artan pik enini müşahidə edə bilərik. Bununla belə, bu, bir dezavantaja gətirib çıxarır - gec elusiya üçün gec elusiya zirvələri çox düz və geniş olur. Buna görə də, bu geniş zirvələrin zirvə kimi tanınması çətinləşir.
Bundan başqa, izokratik elüsyonda selektivlik sütun ölçülərinə görə dəyişmir. Bu o deməkdir ki, seçicilik sütun ölçülərindəki dəyişikliklərdən asılı deyil. Burada uzunluq və diametr sütun ölçüləri kimi qəbul edilir. Buna görə də, zirvələr eyni ardıcıllıqla seçilir.
Qradient Elüsyon nədir?
Qradient elüsyon xromatoqrafiyada burada mobil faza müxtəlif konsentrasiyaya malik olduqda istifadə olunan termindir. Başqa sözlə, mobil fazanın konsentrasiyası sabit qalmamalıdır. Məsələn, HPLC-də ümumi ayırma üsulu ilkin olaraq 10% metanoldan istifadə edir və konsentrasiyanı tədricən artırmaqla 90% ilə bitir. Mobil faza iki komponentdən ibarətdir: zəif həlledici və güclü həlledici. Zəif həlledici məhlulun yavaş-yavaş süzülməsinə imkan verir, güclü həlledici isə məhlulun sürətli elüsiyasına səbəb olur. Əks fazalı xromatoqrafiyada zəif həlledici kimi sudan, güclü həlledici kimi isə üzvi həlledicidən istifadə edirik.
Şəkil 01: HPLC
Bundan başqa, qradiyent elüsyon metodu xromatoqramda dar bir zirvə verərək, onları daha sürətli elüt etmək üçün sonrakı elüsyon komponentlərini azaldır. Bu üsul zirvə formasını və zirvə hündürlüyünü də yaxşılaşdırır. Bundan əlavə, gradient elüsyon texnikasında elüsyon sırası sütun ölçülərindəki dəyişikliklərlə dəyişir.
İzokratik və Gradient Elüsyon Arasındakı Fərq Nədir?
Xromatoqrafiyada izokratik və qradient elüsyon terminləri istifadə olunur. İsokratik və qradient elüsyon mobil fazanın xüsusiyyətlərini təsvir edir. İzokratik və qradient elüsyon arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, izokratik elüsyon mobil fazada sabit konsentrasiyanın saxlanmasına, qradient elüsiya isə mobil fazada dəyişən konsentrasiyanın saxlanmasına aiddir.
İzokratik elüsyon texnikasında pik eni tutma vaxtı ilə xətti olaraq artır. Bununla belə, qradiyent elüsyon texnikasında sonradan çıxan komponentlərin saxlanması azalır, beləliklə, elüsyon daha sürətli olur və dar piklər verir. Bundan başqa, izokratik elüsyonda selektivlik sütun ölçülərindən asılı deyil, qradiyent elüsyonda isə selektivlik sütun ölçülərinin dəyişməsi ilə dəyişir.
Aşağıdakı cədvəldə izokratik və qradiyent elüsyon arasındakı fərq ümumiləşdirilir.
Xülasə – Isocratic vs Gradient Elusion
İsokratik elüsyon və qradient elüsyon mobil fazanın xüsusiyyətlərini təsvir edir. İzokratik və qradient elüsyon arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, izokratik elüsyon mobil fazada sabit konsentrasiyanın saxlanmasına, qradient elüsiya isə mobil fazada dəyişən konsentrasiyanın saxlanmasına aiddir.