Yaxınlıq və ion mübadiləsi xromatoqrafiyası arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, biz qarışığın yüklü və ya yüksüz komponentlərini ayırmaq üçün yaxınlıq xromatoqrafiyasından istifadə edə bilərik, halbuki qarışıqdakı yüklü komponentləri ayırmaq üçün ion mübadiləsi xromatoqrafiyasından istifadə edə bilərik.
Xromatoqrafiya bir qarışıqda istədiyiniz komponentləri ayırmaq üçün istifadə edə biləcəyimiz bir texnikadır. Maye xromatoqrafiyası, qaz xromatoqrafiyası və s. kimi müxtəlif növləri var. Yaxınlıq xromatoqrafiyası və ion mübadiləsi xromatoqrafiyası maye xromatoqrafiyasının iki alt kateqoriyasıdır. Həmçinin, bu texnikalarda iki mərhələ var. Onlar stasionar faza və mobil fazadır. Bu üsulların məqsədi komponentlərin bağlanmasından asılı olaraq mobil fazadakı komponentləri stasionar fazanın səthinə ayırmaqdır.
Yaxşılıq Xromatoqrafiyası nədir?
Yaxşılıq xromatoqrafiyası bu komponentlər arasındakı qarşılıqlı təsirdən asılı olaraq qarışıqdakı komponentləri ayırmaq üçün istifadə etdiyimiz biokimyəvi texnikadır.
Bu halda istifadə etdiyimiz qarşılıqlı təsirlərə aşağıdakılar daxildir:
- Antigen-antikor qarşılıqlı əlaqəsi
- Ferment-substrat qarşılıqlı təsirləri
- Reseptor-liqand qarşılıqlı əlaqəsi
- Protein-nuklein turşusu qarşılıqlı əlaqəsi
Bu texnikada biz bu ayırma texnikası üçün molekulların molekulyar xüsusiyyətlərindən istifadə edirik. Burada istənilən birləşmənin stasionar faza ilə hidrogen bağı, ion qarşılıqlı təsiri, disulfid körpüləri, hidrofobik qarşılıqlı təsir və s. Stasionar faza ilə qarşılıqlı təsir göstərməyən molekullar əvvəlcə süzülür. Beləliklə, onu qarışıqdan ayıra bilərik. İstədiyiniz birləşmə stasionar faza bağlı qalacaq. Buna görə də, biz onu süzən bir həlledicidən istifadə edərək ayıra və onu da ayırmaq üçün elüt edə bilərik.
Şəkil 01: Xromatoqrafik Sütun
Yaxşılıq xromatoqrafiyası bufer məhlulundan istifadə edərək qarışıqdan maddənin təmizlənməsi və konsentrasiyasında faydalıdır. Bundan əlavə, qarışıqdakı arzuolunmaz maddələrin azaldılmasında faydalıdır. Bu proses üçün istifadə etdiyimiz aparatı nəzərdən keçirərkən, stasionar fazamızla doldurulmuş bir sütundan istifadə etməliyik. Sonra, ayıracağımız biomolekulları ehtiva edən mobil fazanı yükləməliyik. Sonra, onların stasionar faza ilə bağlanmasına icazə verin. Bundan sonra, yuma tamponundan istifadə edərək, biz qeyri-hədəf biomolekulları ayıra bilərik, lakin ayırma prosesinin uğurla başa çatması üçün hədəf molekulların stasionar fazaya yüksək yaxınlığı olmalıdır.
İon mübadiləsi xromatoqrafiyası nədir?
İon xromatoqrafiyası ion maddələrini təhlil edə biləcəyimiz maye xromatoqrafiya formasıdır. Çox vaxt biz ondan qeyri-üzvi anionları və kationları (yəni xlorid və nitrat anionları və kalium, natrium kationlarını) analiz etmək üçün istifadə edirik. Daha az yaygın olsa da, üzvi ionları da təhlil edə bilərik. Üstəlik, bu texnikadan zülalların təmizlənməsi üçün istifadə edə bilərik, çünki zülallar müəyyən pH dəyərlərində yüklü molekullardır. Burada yüklü hissəciklərin bağlana bildiyi bərk stasionar fazadan istifadə edirik. Məsələn, qatran polistirol-divinilbenzol kopolimerlərini bərk dayaq kimi istifadə edə bilərik.
Şəkil 02: İon Mübadilə Xromatoqrafiyasının Fazaları
Bunu daha da izah etmək üçün stasionar faza sulfat anionları və ya dördüncü amin kationları kimi sabit ionlara malikdir. Əgər bu sistemin neytrallığını qorumaq istəyiriksə, bunların hər biri əks ionla (əks yüklü ion) birləşməlidir. Burada əks ion kationdursa, sistemi kation mübadilə qatranı adlandırırıq. Lakin əks ion aniondursa, sistem anion mübadilə qatranıdır.
İon mübadiləsi prosesində beş əsas mərhələ var;
- İlkin mərhələ
- Hədəfin adsorbsiyası
- Elüsyonun başlanğıcı
- Elüsyonun sonu
- Regenerasiya
Yaxınlıq və İon Mübadilə Xromatoqrafiyası Arasındakı Fərq Nədir?
Yaxınlıq xromatoqrafiyası bu komponentlər arasındakı qarşılıqlı təsirdən asılı olaraq qarışıqdakı komponentləri ayırmaq üçün istifadə etdiyimiz biokimyəvi texnikadır, halbuki ion xromatoqrafiyası ion maddələrini təhlil edə biləcəyimiz maye xromatoqrafiya formasıdır. Buna görə də, yaxınlıq və ion mübadiləsi xromatoqrafiyası arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, ion mübadiləsi xromatoqrafiyasından yalnız ion maddələrinin ayrılması üçün istifadə edə bilərik, halbuki yaxınlıq xromatoqrafiyası həm yüklü, həm də yüksüz hissəcikləri ayıra bilir. İş prinsipini nəzərdən keçirərkən, yaxınlıq və ion mübadiləsi xromatoqrafiyası arasındakı fərq, yaxınlıq xromatoqrafiyasının hədəf molekulların stasionar faza üçün yüksək yaxınlığa malik olması səbəbindən davam etməsidir. Bununla belə, ion mübadiləsi xromatoqrafiyası üçün hədəf molekullar stasionar faza səthinin yükü ilə əks yükə malikdir.
Aşağıdakı infoqrafika yaxınlıq və ion mübadiləsi xromatoqrafiyası arasındakı fərqi yan-yana müqayisə kimi təqdim edir.
Xülasə – Yaxınlıq və İon Mübadilə Xromatoqrafiyası
Xülasə olaraq, yaxınlıq və ion mübadiləsi xromatoqrafiyası maye xromatoqrafik texnikanın iki formasıdır. Yaxınlıq və ion mübadiləsi xromatoqrafiyası arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, biz qarışıqdakı yüklü və ya yüksüz komponentləri ayırmaq üçün yaxınlıq xromatoqrafiyasından istifadə edə bilərik, halbuki qarışıqdakı yüklü komponentləri ayırmaq üçün ion mübadiləsi xromatoqrafiyasından istifadə edə bilərik.
