Gel filtrasiyası ilə yaxınlıq xromatoqrafiyası arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, gel filtrasiya xromatoqrafiyası analit nümunəsinin molekulyar çəkisi və ya ölçüsündəki fərqlərdən asılıdır, yaxınlıq xromatoqrafiyası isə analitin hərəkətsizləşdirilmiş liqandla yaxınlığından asılıdır.
Analitik kimyada xromatoqrafiya termini müxtəlif üsullardan istifadə edərək qarışıqda komponentlərin ayrılması prosesinə aiddir. Xromatoqrafiya ayırmaq üçün müxtəlif sayda müxtəlif üsulları təmsil edən ümumi addır.
Gel filtrasiya xromatoqrafiyası nədir?
Gel filtrasiya xromatoqrafiyası komponentlərin ayrılmasının molekulyar çəki və ya ölçü fərqindən asılı olduğu analitik üsuldur. Bu üsul həm də ölçü istisna edən xromatoqrafiya və ya molekulyar ələk xromatoqrafiyası kimi tanınır. Bu prosesdə ayırma texnikası nümunədəki molekulların gel-filtrasiya mühitinin məsamələrinə daxil olmaq qabiliyyətindən asılıdır.
Gel filtrasiya texnikasında stasionar faza, dar ölçü diapazonunu ehtiva edən molekulyar ölçülərdə məsamələri olan nəmlənmiş, süngərəbənzər materialın muncuqlarını ehtiva edir. Müxtəlif ölçülü molekullardan ibarət sulu məhlulu bu “molekulyar ələkləri” ehtiva edən sütundan keçirsək, filtrasiya mühitinin məsamələrindən böyük olan molekullar sütundan sürətlə hərəkət edirlər. Bunun əksinə olaraq, kiçik molekullar gelin məsamələrinə daxil olur və sütun boyunca yavaş-yavaş hərəkət etməyə meyllidirlər. Molekullar molekulyar ölçüsünü az altmaq üçün sütundan ayrılır. Burada gelin istisna həddi verilmiş gelin məsamələrinə nüfuz edə bilməyən ən kiçik molekulların molekulyar kütləsidir.
Gel filtrasiya üsullarının müxtəlif növləri var, məsələn, dolayı gel filtrasiyası üsulu, sabit vəziyyətli gel filtrasiyası, gel muncuq dializi və s. Dolayı gel filtrasiya xromatoqrafiyası sərbəst tiroid hormonlarının təyinində faydalıdır. Sabit vəziyyətli gel filtrasiya xromatoqrafiyası əsasən kortizol, testosteron və s. kimi sərbəst steroidlərin ölçülməsi üçün faydalı olan dolayı üsuldur. Digər tərəfdən, gel muncuq dializi, nisbətən daha sadə olan stabil vəziyyətli gel filtrasiyasının modifikasiyasıdır.
Yaxşılıq Xromatoqrafiyası nədir?
Yaxşılıq xromatoqrafiyası immobilizasiya olunmuş liqand və onun bağlayan tərəfdaşı arasında xüsusi bir əlaqə təsirindən asılı olan analitik texnika və ayırma üsuludur. Bəzi nümunələrə antikor-antigen bağlanması, ferment-substrat bağlanması və ferment-inhibitor bağlanması daxildir. Buna görə də, bu texnikanın nuklein turşularının təmizlənməsində, hüceyrə ekstraktlarından zülalların təmizlənməsində və qandan təmizlənmədə bir çox mühüm tətbiqləri var.
Bu texnikada ən mühüm xüsusiyyət ligandın hərəkətsizləşməsidir. Bunun üçün akrilatlar və silikagel kimi müxtəlif materiallardan istifadə edə bilərik. Hədəf molekulun liqandla sterik müdaxiləsinin qarşısını almaq vacibdir. Üstəlik, bərk faza bir inhibitor əlavə olunur. Biz bu inhibitoru boşluq adlandırırıq. Klassik olaraq boşluq karbohidrogen zəncirindən ibarətdir.
Yaxınlıq xromatoqrafiyasının stasionar fazası nüvəni, spacer və liqanddan ibarətdir. Bəzən liqandla birləşən bir metal ionu da var. Bu texnikada stasionar faza üçün ən çox seçilən bərk faza agaroz geldir, çünki o, sütunu istənilən ölçülü qatran yataqları ilə doldurmaq və qablaşdırmaq üçün asanlıqla paylanır və biomolekulların muncuqlara sərbəst axması üçün kifayət qədər böyükdür. Liqandlar müxtəlif yollarla muncuq polimerinə kovalent bağlana bilər. Ən çox yayılmış spacer birləşmələri siyanogen bromid, epoksid, C6 turşusu ilə epoksid və diamindir. Digər tərəfdən, istifadə edə biləcəyimiz liqand hədəfə görə fərqlənir, məsələn, antikor-antigen, dəmir və ya alüminium ionları-fosfoproteinlər, avidin-biotin, glutatyon-GST, chelator-Onun işarəli zülalları və s.
Gel filtrasiyası ilə yaxınlıq xromatoqrafiyası arasındakı fərq nədir?
Xromatoqrafiya mühüm analitik texnikadır. Gel filtrasiya xromatoqrafiyası və yaxınlıq xromatoqrafiyası xromatoqrafiyanın iki vacib varyasiyasıdır. Gel filtrasiyası ilə yaxınlıq xromatoqrafiyası arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, gel filtrasiya xromatoqrafiyası analit nümunəsinin molekulyar çəkisi və ya ölçüsündəki fərqlərdən asılıdır, halbuki yaxınlıq xromatoqrafiyası bir analitin immobilizasiya edilmiş bir ligandla yaxınlığından asılıdır.
Xülasə – Gel filtrasiyası və yaxınlıq xromatoqrafiyası
Tətbiqinə və analit nümunəsinin təbiətinə görə müxtəlif növ xromatoqrafik üsullar mövcuddur. Gel filtrasiyası və yaxınlıq xromatoqrafiyası bu cür iki növ texnikadır. Gel filtrasiyası ilə yaxınlıq xromatoqrafiyası arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, gel filtrasiya xromatoqrafiyası analit nümunəsinin molekulyar çəkisi və ya ölçüsündəki fərqlərdən asılıdır, yaxınlıq xromatoqrafiyası isə analitin hərəkətsizləşdirilmiş liqandla yaxınlığından asılıdır.
