Tərs faza ilə normal fazalı HPLC arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, əks fazalı HPLC qeyri-polyar stasionar faza və qütb mobil fazadan istifadə edir, normal fazalı HPLC isə qütb stasionar faza və daha az qütblü mobil fazadan istifadə edir.
Normal faza HPLC, Tswett-in bitki ekstraktlarının ayrılması zamanı istifadə etdiyi HPLC-nin ən qədim texnikasıdır; şüşə sütunda təbaşirdən istifadə etdi. Bu, xromatoqrafiyanın klassik üsulu idi və onun "normal" texnika kimi adlandırılmasına səbəb oldu. Əks fazalı HPLC isə elm adamlarının son vaxtlar inkişaf etdirdiyi normal texnikanın əksidir.
Tərs Fazalı HPLC nədir?
Tərs faza HPLC, hidrofobik stasionar fazadan istifadə etdiyimiz xromatoqrafik texnikadır. Bütün HPLC üsulları arasında geniş tətbiqi və təkrar istehsal qabiliyyətinə görə bu metodu təxminən 70% istifadə edirik. Stasionar faza qeyri-qütbdür, mobil faza isə qütbdür.
Əksər hallarda alimlər mobil faza kimi asetonitril və ya metanol kimi qarışan, qütb üzvi həlledici ilə suyun sulu qarışığından istifadə edirlər. Buna görə də, analitlər qeyri-polyar stasionar faza ilə qarşılıqlı əlaqədə olurlar.
Normal Faza HPLC nədir?
Normal faza HPLC, hidrofilik stasionar fazadan istifadə etdiyimiz xromatoqrafik texnikadır. HPLC-nin ənənəvi üsuludur, baxmayaraq ki, biz ondan çox istifadə etmirik. Stasionar faza qütb, mobil faza isə qeyri-qütbdür. Daha da əhəmiyyətlisi, bu texnikanın mobil fazası 100% orqanikdir. Bu o deməkdir ki, bunun üçün su istifadə edilmir.
Şəkil 01: Analitdəki komponentlərin polaritesinə görə normal faza və tərs faza HPLC xromatoqramları üçün nümunə profili.
Adətən, stasionar faza silisium oksidi, siyano, diol, aminlə birləşdirilmiş fazaları və s. ehtiva edir. Mobil fazalara heksan, etil asetat və s. kimi üzvi həlledicilər daxildir. Bu texnika həlledici və ya analit molekullarının səthdə saxlanmasına əsaslanır. qütb stasionar faza.
Tərs Faza ilə Normal Faza HPLC Arasındakı Fərq Nədir?
Tərs faza HPLC, hidrofobik stasionar fazadan istifadə etdiyimiz xromatoqrafik texnikadır. Bu texnikanın stasionar mərhələsi qeyri-qütb, mobil faza isə qütbdür. Üstəlik, alimlər əks fazalı HPLC-də mobil faza kimi asetonitril və ya metanol kimi qarışan, qütb üzvi həlledici ilə suyun sulu qarışığından istifadə edirlər. Bunun əksinə olaraq, normal faza HPLC hidrofilik stasionar fazadan istifadə etdiyimiz xromatoqrafik bir texnikadır. Bu texnikanın stasionar fazası qütb, mobil faza isə qeyri-qütbdür. Bundan əlavə, alimlər normal fazalı HPLC-nin mobil fazası kimi heksan, etil asetat və s. kimi üzvi həlledicilərdən istifadə edirlər. Aşağıdakı infoqrafika əks faza ilə normal faza HPLC arasındakı fərqi cədvəl şəklində təqdim edir.
Xülasə – Əks Faza və Normal Faza HPLC
Tərs faza və normal faza HPLC üsulları iki maye xromatoqrafiya üsuludur. Əks faza ilə normal fazalı HPLC arasındakı əsas fərq, əks fazalı HPLC-nin qütbsüz stasionar fazadan və qütb mobil fazasından istifadə etməsidir, normal fazalı HPLC isə qütb stasionar fazadan və daha az qütblü mobil fazadan istifadə edir.
