Əsas Fərq – In Situ Hibridləşmə vs İmmunohistokimya
Xərçəng və yoluxucu xəstəliklərin diaqnostikası şişlərin və ya yoluxucu hüceyrələrin, onların yayılmasının və hüceyrələrin inkişaf yerlərinin müəyyən edilməsi və əksər yoluxucu və yoluxucu xəstəliklərin genetik əsaslarının təhlili məqsədilə yeni proteomika və genomikaya əsaslanan üsulların istifadə edildiyi məşhur tendensiyadır. yoluxucu olmayan xəstəliklər. Bu, dərmanların dəqiq emalı və dizaynı və xəstəliklər üçün fərdi müalicələrin hazırlanması ilə nəticələnəcəkdir. Yerində hibridləşmə (ISH) və İmmunohistokimya (IHC) xərçəng biologiyasında geniş istifadə olunan iki üsuldur və in situ hibridizasiya ilə immunokimya arasındakı əsas fərq analiz prosedurunda istifadə olunan molekullardadır. ISH-də nuklein turşusu zondları analizdə, IHC-də isə diaqnostik təyinatlar üçün monoklonal və poliklonal antikorlardan istifadə edilir.
İn Situ Hibridləşmə (ISH) nədir?
İn situ hibridləşmə birbaşa toxumanın bir hissəsində və ya hissəsində, bütün toxumada və ya hüceyrələrdə həyata keçirilən nuklein turşusunun hibridləşdirilməsi üsuludur. Texnika Watson Crick-in tamamlayıcı baza cütləşməsi nəzəriyyəsindən asılıdır, nəticədə ya DNT-DNT hibridləri, ya da mutasiyaya uğramış genləri aşkarlaya bilən və ya tələb olunan maraq geni müəyyən edə bilən DNT-RNT hibridləri yaranır. Hibridləşdirmə texnikası zamanı zond kimi tək zəncirli DNT ardıcıllıqları, ikiqat zəncirli DNT ardıcıllıqları, tək zəncirli RNT ardıcıllıqları və ya sintetik oliqonukleotid ardıcıllıqları istifadə olunur və bu zondlar 5' ucunda radioaktiv fosforla etiketlənir və ya avtoradioqrafik etiketlərdən istifadə edərək identifikasiya prosedurları üçün. İstifadə olunan zond növünə və izlənilən vizuallaşdırma texnikasının növünə görə müxtəlif növ ISH texnikaları mövcuddur.
Şəkil 01: Floresan Yerində Hibridləşdirmə
İSH-nin bir çox tətbiqi var, əsasən yoluxucu xəstəliklərin molekulyar diaqnostikasında patogenlərin mövcudluğunu müəyyən etmək və patogeni molekulyar diaqnostika vasitəsilə təsdiqləmək üçün. O, həmçinin inkişaf biologiyası, karyotipləşdirmə və filogenetik analiz və xromosomların fiziki xəritələşdirilməsi sahələrində istifadə olunur.
İmmunohistokimya (IHC) nədir?
IHC texnikasında təhlil edilən əsas molekul antigendir. IHC zamanı monoklonal və poliklonal antikorlar infeksiya və ya bədxassəli hüceyrə proliferasiya statusu zamanı antigenlərin mövcudluğunu müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Texnika antigen-antikor bağlanmasına əsaslanır və bu texnika üçün ferment etiketləri istifadə olunur; belə tətbiqlərdən biri də ELISA (Fermentlə əlaqəli immunosorbent analizidir). Markerlər həmçinin flüoresan işarəli antikorlar və ya radio ilə işarələnmiş antikorlar ola bilər.
Şəkil 02: İmmunohistokimya
IHC xərçəng hüceyrələrinin aşkarlanması üçün geniş istifadə olunur. Diaqnostik prosedurlar şişi müəyyən etmək və xarakterizə etmək üçün şiş hüceyrələrində mövcud olan antigenləri hədəf alır. Eyni prosedur yoluxucu agentlərin diaqnostikası üçün də daxil edilir. Monoklonal və Poliklonal antikorlar, həmçinin istənilən zülal və tətbiq edilən sintetik antikor arasında antikor-antigen bağlama reaksiyasını təmin etməklə müxtəlif gen məhsullarını təhlil etmək üçün istifadə olunur.
İn Situ Hibridləşmə və İmmunohistokimya Arasındakı oxşarlıqlar nələrdir?
- ISH və IHC yüksək spesifik reaksiyalardır.
- Hər iki texnika yüksək dəqiqliyə malikdir.
- Hər iki üsul xərçəng və yoluxucu xəstəliklərin diaqnostikasında istifadə edilə bilər.
- Bu texnikalar steril in-vitro mühitlərdə həyata keçirilir.
- Hər ikisi təkrarlana bilən nəticələr verən sürətli üsullardır.
- ISH və IHC radio etiketləmə və flüoresan texnikası kimi aşkarlama üsullarından istifadə edir.
İn Situ Hibridləşmə ilə İmmunohistokimya Arasındakı Fərq Nədir?
İn Situ Hibridləşmə vs İmmunohistokimya |
|
| ISH birbaşa toxumanın bir hissəsi və ya bölməsi və ya bütün toxuma üzərində həyata keçirilən nuklein turşusunun hibridləşdirilməsi üsuludur. | IHC hüceyrə səthlərinə yerləşdirilən xüsusi zülal markerləri olan antigenlərin varlığını təyin etmək üçün monoklonal və poliklonal antikorların istifadə edildiyi bir texnikadır. |
| Təhlil edilən Biomolekulların Növü | |
| ISH nuklein turşularını təhlil edir. | IHC zülal-antigenləri təhlil edir. |
| Biokimyəvi Reaksiyanın Əsasları | |
| DNT-DNT və ya DNT-RNT arasında tamamlayıcı baza cütləşməsi bu texnikada baş verir. | Antigen-antikor qarşılıqlı əlaqəsi immunohistokimyada iştirak edir. |
| Fermentlə Bağlı Aşkarlama Metodları | |
| Fermentlə əlaqəli aşkarlama üsulları ISH-də istifadə edilə bilməz. | Fermentlə əlaqəli aşkarlama üsulları IHC-də istifadə edilə bilər. |
Xülasə – In Situ Hibridləşmə vs İmmunohistokimya
Molekulyar diaqnostika, xəstəliyin təzahürünə səbəb olan hüceyrələrdə mövcud olan molekulyar markerlərə əsaslanaraq xərçəng və ya HİV və ya Vərəm kimi yoluxucu olmayan xəstəliyi müəyyən etmək üçün istifadə edilə bilən sürətli və təsdiqedici üsullardır.. Molekulyar markerlər ifadə edilmiş zülallar şəklində və ya genetik səviyyədə mövcud ola bilər ki, bu üsullar yüksək xərc tələb etsə də, səmərəliliyi artırmaq üçün müxtəlif yeni texnikalar tətbiq edilir və daha az zəhmət tələb edir. Beləliklə, ISH DNT-DNT və ya DNT-RNT hibrid formalaşmasından, IHC isə antikor və antigen arasındakı spesifik reaksiyalardan asılıdır. Bu, in situ hibridləşdirmə arasındakı fərqdir.
İmmunohistokimyaya qarşı In Situ Hibridləşmənin PDF Versiyasını endirin
Bu məqalənin PDF versiyasını yükləyə və sitat qeydinə əsasən onu oflayn məqsədlər üçün istifadə edə bilərsiniz. Zəhmət olmasa PDF versiyasını buradan yükləyin In Situ Hibridləşmə və İmmunohistokimya Arasındakı Fərq.
