Əsas Fərq – İlkin və İkincili Hüceyrə Mədəniyyəti
İbtidai və İkincil Hüceyrə Mədəniyyəti arasındakı fərqi müzakirə etməzdən əvvəl gəlin əvvəlcə hüceyrə mədəniyyətinin nə olduğunu qısaca müəyyənləşdirək. Hüceyrə mədəniyyəti heyvan və ya bitkidən hüceyrələrin çıxarılması və sonradan süni şəkildə idarə olunan mühitdə böyüməsi prosesidir. Hüceyrələr birbaşa toxumadan çıxarıla və enzimatik və ya mexaniki üsullarla parçalana bilər və ya artıq qurulmuş bir mədəniyyətdən əldə edilə bilər. İbtidai və ikincili hüceyrə mədəniyyəti arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, ilkin hüceyrə mədəniyyəti üçün hüceyrələr birbaşa heyvan və ya bitki toxumasından, ikincil hüceyrə mədəniyyəti üçün hüceyrələr isə artıq qurulmuş ilkin mədəniyyətdən əldə edilir. Beləliklə, ikinci dərəcəli mədəniyyət ilkin mədəniyyətdən yaranan yeni mədəniyyətdir.
Gəlin onları daha yaxşı fərqləndirmək üçün ilkin və ikincili hüceyrə mədəniyyətinin mənasına daha çox nəzər salaq.
İlkin Hüceyrə Mədəniyyəti nədir?
İlkin hüceyrə mədəniyyəti fermentativ və ya mexaniki tədbirlər vasitəsilə ana heyvan və ya bitki toxumasından hüceyrələrin ayrılması və nəzarət edilən ətraf mühit şəraitində şüşə və ya plastik qablarda uyğun substratda hüceyrələrin böyüməsinin təmin edilməsidir. İlkin mədəniyyətdəki hüceyrələr, orijinal toxumadakı hüceyrələrlə eyni karyotipə (eukaryotik hüceyrənin nüvəsindəki xromosomların sayı və görünüşü) malikdirlər. İlkin hüceyrə mədəniyyəti kulturada istifadə edilən hüceyrələrin növünə görə iki yerə təsnif edilə bilər.
Ankorajdan Asılı və ya Yapışqan Hüceyrə – Bu hüceyrələr böyümə üçün qoşma tələb edir. Yapışqan hüceyrələr adətən orqanların toxumalarından, məsələn, hüceyrələrin hərəkətsiz olduğu və birləşdirici toxuma içərisində yerləşdiyi böyrəkdən əldə edilir
Ankrajdan Müstəqil və ya Asma Hüceyrələr – Bu hüceyrələr böyümə üçün əlavə tələb etmir. Başqa sözlə, bu hüceyrələr mədəniyyət qabının səthinə yapışmır. Bütün suspenziya mədəniyyətləri qan sisteminin hüceyrələrindən alınır; məsələn, ağ qan hüceyrəsi lenfosit plazmada dayandırılır
İlkin mədəniyyətlərdən əldə edilən hüceyrələrin məhdud ömrü var. Hüceyrələr bir neçə səbəbə görə qeyri-müəyyən müddətə saxlanıla bilməz. İlkin mədəniyyətdə hüceyrə sayının artması substratın və qida maddələrinin tükənməsinə səbəb olacaqdır. Həmçinin, hüceyrə fəaliyyəti mədəniyyətdəki zəhərli metabolitlərin səviyyəsini tədricən artıraraq hüceyrə böyüməsini maneə törədir.
Bu mərhələdə hüceyrənin davamlı böyüməsini təmin etmək üçün ikinci dərəcəli və ya subkultura aparılmalıdır.
İkinci Hüceyrə Mədəniyyəti nədir?
Yuxarıda təsvir olunduğu kimi, yapışan kulturalardakı hüceyrələr bütün mövcud substratı tutduqda və ya asma kulturalardakı hüceyrələr gələcək böyüməni dəstəkləmək üçün mühitin tutumunu aşdıqda, hüceyrə proliferasiyası azalmağa başlayır və ya tamamilə dayanır. Davamlı böyümə üçün optimal hüceyrə sıxlığını saxlamaq və daha çox yayılmasını stimullaşdırmaq üçün ilkin mədəniyyət subkulturasiya edilməlidir. Bu proses ikincili hüceyrə mədəniyyəti kimi tanınır.
İkinci hüceyrə kulturası zamanı ilkin kulturadan alınan hüceyrələr təzə inkişaf mühiti olan yeni bir qaba köçürülür. Proses əvvəlki böyümə mühitinin çıxarılmasını və yapışan ilkin mədəniyyətlərdə yapışan hüceyrələrin ayrılmasını əhatə edir. Hüceyrələri böyüyən yer və təzə qida maddələri ilə təmin etmək, bununla da hüceyrələrin ömrünü uzatmaq və mədəniyyətdə bir sıra hüceyrələri genişləndirmək üçün vaxtaşırı ikincili hüceyrə kultivasiyası tələb olunur.
Birinci dərəcəli kulturanın müəyyən həcminin bərabər həcmdə təzə böyümə mühitinə çevrilməsi hüceyrə xətlərinin uzunmüddətli saxlanmasına imkan verir. Hüceyrələrin sayını artırmaq üçün, məsələn, sənaye proseslərində və ya elmi təcrübələrdə daha böyük həcmdə təzə böyümə mühitinə ikinci dərəcəli kultivasiya tətbiq edilir.
İbtidai Hüceyrə Mədəniyyəti ilə İkincil Hüceyrə Mədəniyyəti arasındakı fərq nədir?
İndi iki termini ayrı-ayrılıqda başa düşdüyümüz üçün onlar arasında digər fərqləri tapmaq üçün ikisini müqayisə edəcəyik.
İbtidai və/və ya İkincil Hüceyrə Mədəniyyətindən Nə Zaman İstifadə Edilməli
Bu, nə öyrənmək istədiyinizdən və həyata keçirdiyiniz təcrübədən asılıdır.
İlkin Hüceyrə Mədəniyyəti: Bu, narahatlıq doğuran valideyn toxumasından hüceyrələrin yetişdirilməsi üçün istifadə ediləcək prosesdir. İlkin mədəniyyətdəki hüceyrələr, substrat və qida maddələrinin tükənməsi və toksinlərin yığılması səbəbindən populyasiyanın artması ilə məhdud bir ömür sürəcəkdir. İzolyasiya prosesində istifadə edilən ayırma üsullarına baxmayaraq, ilkin mədəniyyət bir neçə növ hüceyrəni ehtiva edə bilər. Bununla belə, bu, bütün növ təcrübələrdə problem olmaya bilər və belə hallarda yalnız ilkin mədəniyyətdən istifadə edilə bilər.
İkinci Hüceyrə Mədəniyyəti: Təcrübələrdə adətən ilkin kulturadan alınan hüceyrələrin sayı qeyri-kafi olur. İkinci dərəcəli hüceyrə mədəniyyəti hüceyrə populyasiyasını genişləndirməyə və həmçinin ömrünü uzatmağa imkan verir. Bu, seçici mühitdən istifadə etməklə hüceyrələrin sonrakı seçilməsinə imkan verir və populyasiyada genotipik və fenotipik vahidliyə imkan verir. Bu proses əsas xarakteristikalar, qorunma və təcrübə üçün təkrar mədəniyyətlər yaratmaq üçün istifadə olunur.
Valideyn toxumasına bənzərlik
İlkin Hüceyrə Mədəniyyəti: İlkin hüceyrə mədəniyyəti üçün hüceyrələr birbaşa heyvan və ya bitki toxumasından əldə edilir. Beləliklə, ilkin mədəniyyətdəki hüceyrələr onun ana toxumasına çox bənzəyir və müvafiq olaraq, bioloji reaksiya ikincil hüceyrə mədəniyyətindən daha çox in vivo vəziyyətə yaxın ola bilər.
İkinci Hüceyrə Mədəniyyəti: İkincil hüceyrə mədəniyyəti ilkin hüceyrə mədəniyyətindən yaranır. Subkulturasiya hüceyrələrin ömrünü uzatsa da, bir neçə mərhələdən sonra hüceyrələrin transformasiyaya uğraması və ya müəyyən bir müddətdən çox bölünməməyə nəzarəti itirməsi ehtimalı var. Bunun səbəbi subkulturasiya zamanı ilkin hüceyrələrdə mutasiyalar və ya genetik dəyişikliklər ola bilər. Məsələn, bəzi mikroorqanizmlər biologiyalarını dəyişdirərək, təbii mühitlərindən çox fərqli olan mədəniyyət şəraitinə uyğunlaşmağa meyllidirlər.
Kulturma Prosesi – Hüceyrələrin Alınması
İlkin Hüceyrə Mədəniyyəti: İlkin hüceyrə mədəniyyətində heyvan və ya bitki toxuması yuyulma, parçalanma və mexaniki və ya fermentativ parçalanma mərhələlərindən keçəcək. Parçalanmış toxuma müxtəlif hüceyrə növlərini ehtiva edəcək və bu, maraqlı hüceyrələri təcrid etmək üçün ayırma texnikasının qəbulunu tələb edə bilər.
İkinci Hüceyrə Mədəniyyəti: İkinci dərəcəli hüceyrə kulturasında, əgər birincil mədəniyyət yapışqan mədəniyyətdirsə, ilk addım hüceyrələri mexaniki və ya enzimatik vasitələrlə birləşmədən (mədəniyyət qabının səthindən) ayırmaqdır. Sonra tək hüceyrə süspansiyonu yaratmaq üçün hüceyrələr bir-birindən ayrılmalıdır.
Mədəniyyətdəki Hüceyrələrin Sayı
İlkin Hüceyrə Mədəniyyəti: Mütləq tək hüceyrə suspenziyasına malik olmaq arzuolunan deyil, çünki bir çox əsas hüceyrə kiçik qruplarda daha yaxşı yaşayır.
İkinci Hüceyrə Mədəniyyəti: Tək hüceyrə suspenziyası yaratmaq kifayətdir.
Mədəniyyətin Ömrü
İlkin Hüceyrə Mədəniyyəti: İlkin hüceyrə kulturalarının məhdud ömrü var. Yuxarıda izah edildiyi kimi, bunun səbəbi hüceyrələrin böyüməsi substratı və qida maddələrini tükəndirir və zəhərli metabolitlərin yığılmasına səbəb olur. Nəticədə, tədricən hüceyrələrin böyümə sürəti aşağı düşür, bu da hüceyrələrin ölümünə səbəb olur.
İkinci Hüceyrə Mədəniyyəti: İkinci dərəcəli hüceyrə mədəniyyəti hüceyrələrin ömrünü uzadır. Dövri subkulturasiya ilkin hüceyrələrin transformasiyası və ya genetik dəyişdirilməsi vasitəsilə ölməz hüceyrələr yarada bilər.
Çirklənmə riski
İlkin Hüceyrə Mədəniyyəti: İlkin hüceyrə kulturalarına qulluq etmək daha çətindir. Ümumiyyətlə, ilkin hüceyrə mədəniyyətləri amin turşularının, mikroelementlərin, müəyyən hormonların və böyümə faktorlarının zəngin qarışığına ehtiyac duyur. Nəticədə, ilkin hüceyrə mədəniyyətlərində çirklənmə riski ikincili hüceyrə kulturalarından daha yüksəkdir.
İkinci Hüceyrə Mədəniyyəti: İkinci dərəcəli hüceyrə kulturalarını saxlamaq nisbətən asandır və çirklənmə riski ilkin hüceyrə kulturalarından daha azdır.
Bu məqalədə biz ilkin hüceyrə mədəniyyəti və ikincil hüceyrə mədəniyyəti terminlərini başa düşməyə çalışdıq, sonra onlar arasındakı əsas fərqləri vurğulamaq üçün müqayisə apardıq. Əsas fərq, hüceyrələrin mədəniyyətdən necə əldə edildiyidir; ilkin hüceyrə mədəniyyəti üçün hüceyrələr birbaşa heyvan və ya bitki toxumasından, ikincili hüceyrə mədəniyyəti üçün hüceyrələr isə artıq qurulmuş ilkin mədəniyyətdən əldə edilir.
