DNT ilə RNT izolyasiyası arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, DNT izolyasiyası DNT adlı bir növ nuklein turşusunun bioloji hüceyrədən çıxarılması prosedurudur, RNT təcrid edilməsi isə RNT adlanan nuklein turşusunun bir növünün olduğu bir prosedurdur. bioloji hüceyrədən çıxarılıb.
Nuklein turşusu izolyasiyası aşağı axın tətbiqlərinin geniş spektrində başlanğıc nöqtəsidir. Başlanğıc nümunələrdəki nuklein turşularının yüksək keyfiyyəti sonrakı aşağı axın tətbiqlərinin uğuru üçün əsas amildir. Nuklein turşusunun təcrid edilməsi müxtəlif aşağı axın tətbiqi addımları üçün istifadə oluna bilən təmizlik nümunəsində nuklein turşusu əldə etmək üçün bir sıra addımlar kimi müəyyən edilə bilər. Nuklein turşusu ekstraksiyasının məqsədi hüceyrə membranını parçalamaq və DNT və ya RNT kimi saf nuklein turşularını əldə etmək üçün lipidlərin və zülalların maksimum aradan qaldırılmasına nail olmaqdır.
DNT İzolyasiyası nədir?
DNT izolyasiyası bioloji hüceyrədən DNT adlı bir növ nuklein turşusunun çıxarıldığı adi prosedurdur. DNT izolyasiyası qandan, dondurulmuş toxuma nümunələrindən və parafin toxuma bloklarından DNT çıxarmaqla həyata keçirilir. Hüceyrə lizisi, DNT-nin çıxarılması və çöküntü daxil olmaqla, DNT izolyasiyasında üç əsas addım var. Hüceyrə lizizində nümunədəki hüceyrələr tez-tez üyüdülmə və ya burulğan kimi fiziki vasitələrlə bir-birindən ayrılır və duz ehtiva edən bir məhlulun içinə salınır. Adətən duzun tərkibindəki müsbət yüklü natrium ionları DNT-nin onurğası boyunca uzanan mənfi yüklü fosfat qruplarını qorumağa kömək edir. Daha sonra hüceyrə membranında və nüvələrdə olan lipidləri parçalamaq üçün bir yuyucu vasitə əlavə edilir, bu membranlar pozulduqca DNT-ni buraxır.
Şəkil 01: DNT İzolyasiyası
DNT çıxarılması təmiz DNT nümunəsi əldə etmək üçün həyata keçirilir. Çox vaxt DNT ilə əlaqəli zülalları və digər hüceyrə zülallarını parçalamaq üçün bir proteaz fermenti əlavə olunur. Üstəlik, hüceyrə zibilinin bir hissəsi nümunəni süzməklə çıxarıla bilər. Nəhayət, DNT spirt istifadə edərək çökdürülür. Bundan əlavə, çoxlu DNT varsa, prosedurun sonunda xəsis ağ çöküntü müşahidə edilə bilər.
RNT İzolyasiyası nədir?
RNT izolyasiyası bioloji hüceyrədən RNT adlı bir növ nuklein turşusunun çıxarılması prosedurudur. Bu prosedur tez-tez RNT-ni parçalayan hüceyrələrdə və toxumalarda ribonukleaza fermentlərinin olması ilə çətinləşir. Nümunələrdən RNT-ni təcrid etmək üçün molekulyar biologiyada bir neçə üsuldan istifadə olunur, məsələn, guanidinium-tiosiyanat-fenol-xloroformun çıxarılması.
Şəkil 02: RNT İzolyasiyası
RNT izolyasiyası adətən hüceyrə lizisi və homogenləşməsi, biokimyəvi proseslərin söndürülməsi, nuklein turşusunun bölünməsi, RNT-nin axtarışı, xam təmizlənmə və RNT keyfiyyətinin qiymətləndirilməsi daxil olmaqla bir neçə mərhələdən ibarətdir. Süzgəc kağızına əsaslanan lizis və elüsiya üsulu RNT ekstraksiyasında yüksək ötürmə qabiliyyətinə malikdir. Bundan əlavə, havan və havan istifadə edərək maye azotda RNT çıxarılması da çox faydalı üsuldur, çünki o, ribonukleaz fəaliyyətinin qarşısını alır.
DNT və RNT izolyasiyası arasında hansı oxşarlıqlar var?
- DNT və RNT izolyasiyası iki növ nuklein turşusu təcrid prosedurudur.
- Hər iki prosedurda hüceyrə lizisi, çıxarılması və təmizlənməsi kimi oxşar əsas addımlar var.
- Bu prosedurlar bir sıra aşağı axın tətbiqləri olan mühüm nuklein turşusu növlərini təcrid edir.
- Onlar laboratoriya qurğularında həyata keçirilir.
- Onlar istehsal edilmiş dəstlərdən istifadə etməklə həyata keçirilə bilər.
DNT və RNT İzolyasiyası Arasındakı Fərq Nədir?
DNT təcridində bioloji hüceyrədən DNT adlı bir növ nuklein turşusu, RNT təcridində isə bioloji hüceyrədən RNT adlı bir növ nuklein turşusu çıxarılır. Beləliklə, bu DNT və RNT izolyasiyası arasındakı əsas fərqdir. Bundan əlavə, DNT izolyasiyası normal olaraq pH 7-8 arasında aparılır, RNT təcrid edilməsi isə normal olaraq pH 4.5 civarında aparılır.
Aşağıdakı infoqrafika yan-yana müqayisə üçün DNT və RNT izolyasiyası arasındakı fərqləri cədvəl şəklində təqdim edir.
Xülasə – DNT vs RNT İzolyasiyası
DNT və RNT izolyasiyası iki növ nuklein turşusu təcrid prosedurudur. DNT izolyasiyası bioloji hüceyrədən DNT-nin çıxarılması prosedurudur. RNT izolyasiyası bioloji hüceyrədən RNT-nin çıxarılması prosedurudur. Beləliklə, bu, DNT və RNT izolyasiyası arasındakı əsas fərqdir.
