BCA və Bradford analizi arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, BCA analizi vaxt aparan və daha az dəqiqdir, halbuki Bradford testi tez və dəqiqdir.
BCA və Bradford analizi zülal konsentrasiyasının təyini üçün iki analiz üsuludur. Bu iki analizin fərqli təhlil prinsipləri və dəqiqliklərində fərqlər var.
BCA Təhlili nədir?
BCA analizi və ya bicinchoninic acid testi məhluldakı zülalın ümumi konsentrasiyasını təyin etmək üçün faydalı olan biokimyəvi analizdir. Bu metod həm də onun ixtiraçısı Paul K. Smitin şərəfinə Smith analizi olaraq adlandırılır. Bu analitik üsul Lowry protein analizi, Bradford protein analizi və ya biuret reagenti ilə oxşarlıqlar göstərir. Yaşıldan bənövşəyi rəngə keçən nümunə məhlulunun rəng dəyişikliyi vasitəsilə müəyyən bir nümunədə ümumi protein konsentrasiyasını müşahidə edə bilərik. Bu rəng dəyişikliyi protein tərkibinə mütənasib olaraq baş verir. Bundan sonra nümunədəki rəng intensivliyini və protein tərkibini təhlil etmək üçün kolorimetrik texnikadan istifadə edə bilərik.
BCA Protein Təxmini Metodu
BCA analizinin mexanizmini nəzərdən keçirərkən, tipik BCA məhlulu təxminən 11,25 pH-a malik yüksək qələvi məhluldan ibarətdir və bu məhlulun tərkibinə bicinchoninic turşusu, natrium karbonat, natrium bikarbonat, natrium tartrat və mis (II) sulfat pentahidrat. Bu analiz ilk növbədə iki kimyəvi reaksiyadan asılıdır: zülaldakı peptid bağları ilə mis(II)-nin mis(I)-ə qədər azalması və bicinxonin turşusunun iki molekulunun mis(I) ionu ilə şelasiyası, nəticədə bənövşəyi rəngli kompleks yaranır. 562 nm dalğa uzunluğunda işığı udur. Birinci reaksiyada peptid bağları ilə azalan misin (II) miqdarı nümunədəki zülalın miqdarı ilə mütənasibdir.
Bradford Təhlili nədir?
Bradford analizi məhlulda zülalın konsentrasiyasını ölçmək üçün faydalı olan spektroskopik analitik metoddur. Bu üsul 1976-cı ildə Marion M. Bradford tərəfindən işlənib hazırlanmışdır və bu, nisbətən sürətli və dəqiq üsuldur.
Protein və Bradford Reagentinin Rəng Reaksiyası
Nümunədəki protein miqdarının konsentrasiyasını müəyyən etmək üçün bu üsuldan istifadə edə bilərik. Bu analiz zamanı nümunədə baş verən kimyəvi reaksiya yalnız nümunədəki zülalın amin turşusu tərkibindən asılıdır.
Bradford Protein Təxmini Metodu
Bu analizin metodunu nəzərdən keçirərkən, bu, Coomassie Brilliant Blue G-250 adlı boyanın udma dəyişməsinə əsaslanan kolorimetrik zülal analizidir. Ümumiyyətlə, bu boya anion (mavi) forma, neytral (yaşıl) forma və kationik (qırmızı) formada üç formada mövcuddur. Buna görə də, asidik şəraitdə boya rəngini qırmızıdan maviyə dəyişir. Bunun səbəbi zülalın boya ilə bağlanmasıdır. Bunun əksinə olaraq, boya ilə birləşmək üçün zülal yoxdursa, rəng dəyişikliyi görünmür, məhlul qırmızı-qəhvəyi rəng alır. Bu boya Van der Waal qüvvələri və elektrostatik cazibələr vasitəsilə zülalın karboksil qrupu ilə güclü, kovalent olmayan kompleks əmələ gətirməyə qadirdir.
BCA və Bradford Testi Arasındakı Fərq Nədir?
BCA və Bradford analizi zülal konsentrasiyasının təyini üçün iki analiz üsuludur. Bu iki analizin fərqli təhlil prinsipləri və dəqiqliklərində fərqlər var. BCA və Bradford testi arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, BCA analizi vaxt aparan və daha az dəqiqdir, halbuki Bradford testi tez və dəqiqdir.
Aşağıdakı infoqrafika BCA və Bradford analizi arasındakı fərqləri cədvəl şəklində ümumiləşdirir.
Xülasə – BCA vs Bradford Assay
BCA analizi və ya bicinchoninic acid testi məhluldakı zülalın ümumi konsentrasiyasını təyin etmək üçün faydalı olan biokimyəvi analizdir. Bradford analizi məhluldakı zülalın konsentrasiyasını ölçmək üçün faydalı olan spektroskopik analitik üsuldur. BCA ilə Bradford testi arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, BCA vaxt aparan və daha az dəqiqdir, halbuki Bradford testi tez və dəqiqdir.
