Bredford və Lowry protein analizi arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, Bradford zülal analizi Coomassie parlaq mavi G-250 boyasının absorbsiyasının dəyişməsinə əsaslanır, Lowry protein analizi isə mis ionlarının (Cu+) ionlarının reaksiyasına əsaslanır. peptid bağlarının Folin-Cioc alteu reagenti ilə oksidləşməsi nəticəsində yaranır.
Təhlil nümunənin əsas funksional komponentlərini xarakterizə etməyə kömək edən analitik texnikadır. Beləliklə, analiz həm keyfiyyət, həm də kəmiyyət testi ola bilər. Laboratoriya təbabəti, farmakologiya, ətraf mühit biologiyası, molekulyar biologiya, biokimya və immunologiya da daxil olmaqla bir çox sahələr bu cür analizlərdən müntəzəm istifadə edir. Bradford və Lowry protein analizi nümunə məhlulunda zülal konsentrasiyasını təyin edən iki biokimyəvi analizdir. Hər iki analiz nəticələri təmin etmək üçün kolorimetrik üsullardan istifadə edir.
Bradford Protein Təhlili nədir?
Bradford protein analizi zülal analizi üçün sürətli spektroskopik analitik prosedurdur. Məhlulda zülal konsentrasiyasını ölçərkən yüksək dəqiqlik göstərir. Marion Bradford bu proseduru 1976-cı ildə təqdim etdi. Bu analizdə ümumi reaksiya ölçülən zülalların amin turşusu tərkibinə əsaslanır. Başqa sözlə, Bradford protein analizi kolorimetrik analizdir. Coomassie brilliant blue boyasından istifadə edir. Beləliklə, bu kolorimetrik zülal analizi boyanın absorbsiyasının dəyişməsindən asılıdır. Coomassie parlaq mavi G-250 üç formatda mövcuddur: katyonik (qırmızı), anion (mavi) və neytral (yaşıl). Turşu şəraitdə boyanın qırmızı forması maviyə çevrilir. Zülalın bağlanmasını təsdiqləyir. Zülal yoxdursa, məhlul qəhvəyi rəngdə qala bilər.
Şəkil 01: Bradford protein analizi
Bradford protein analizi digər zülal analizlərindən fərqlənir, çünki o, zülal məhlulunda mövcud olan müxtəlif kimyəvi birləşmələrin müdaxilələrinə daha az həssasdır. Bu birləşmələrə natrium, kalium, qlükoza və saxaroza və s. daxildir.
Lowry Protein Təhlili nədir?
Lowry protein analizi məhluldakı zülalın ümumi səviyyəsini təyin etmək üçün istifadə edilən biokimyəvi analizdir. Oliver H. Lowry 1940-cı ildə bu reagenti inkişaf etdirən şəxsdir. Prosedura məhluldakı protein konsentrasiyasına mütənasib olan rəng dəyişikliyi ilə məhlulun ümumi protein konsentrasiyasını təsvir edir. Beləliklə, bu həm də kolorimetrik zülal analizidir.
Peptid bağlarının oksidləşməsi nəticəsində yaranan mis ionları (Cu+) ilə Folin-Cioc alteu reagenti arasındakı reaksiya bu prosedurun əsasını təşkil edir. Həmçinin, bu reagentin tərkibində fosfomolibdik turşu və fosfor-volfram turşusu var. Bununla belə, Lowry protein analizinin reaksiya mexanizmi yaxşı başa düşülmür. Lakin bu, sistein, triptofan və tirozin qalıqlarının Folin-Cioc alteu reagentinin azaldılması ilə oksidləşməsini nəzərdə tutur.
Şəkil 02: Lowry protein analizi
Sistein qalıqları Lowry zülal analizində müşahidə olunan absorbsiyaya kömək edir və reaksiya parlaq mavi molekulla nəticələnir; heteropol molibden mavi. Bu molekulun azalması 660nm-də absorbansla ölçülür. Beləliklə, Folin-Cioc alteu reagentini azaldan sistein və triptofan qalıqlarının konsentrasiyası məhluldakı zülalın ümumi konsentrasiyasını çıxarır.
Bradford və Lowry Protein Təhlili Arasındakı oxşarlıqlar nələrdir?
- Bradford və Lowry protein analizləri məhluldakı protein konsentrasiyasını təyin edir.
- Hər iki üsul kolorimetrik üsullardır.
- Həmçinin, hər iki üsulun həssaslığı yüksəkdir.
Bradford və Lowry Protein Təhlili Arasındakı Fərq Nədir?
Bradford və Lowry protein analizi məhluldakı protein konsentrasiyasını təyin edən iki növ analizdir. Bradford zülal analizi Coomassie parlaq mavi G-250 boyasının absorbsiyasının dəyişməsinə əsaslanır, Lowry protein analizi isə peptid bağlarının oksidləşməsi nəticəsində yaranan mis ionlarının Folin-Cioc alteu reagenti ilə reaksiyasından asılıdır. Beləliklə, bu, Bradford və Lowry protein analizi arasındakı əsas fərqdir. Bradford zülal analizi nəticə əldə etmək üçün 15 dəqiqə, Lowery zülal analizi isə nəticə əldə etmək üçün 40-60 dəqiqə çəkir. Beləliklə, bu, Bradford və Lowry protein analizi arasındakı başqa bir fərqdir. Bundan əlavə, Bradford zülal analizi amin turşusu tərkibindən, Lowry zülal analizi isə qismən amin turşusu tərkibindən asılıdır. Beləliklə, bu həm də Bradford və Lowry protein analizi arasında fərqdir.
Aşağıda inforafik Bradford və Lowry protein analizi arasındakı fərq haqqında ətraflı məlumat verir.
Xülasə – Bradford vs Lowry Protein Təhlili
Təhlil nümunənin əsas funksional komponentini xarakterizə etmək üçün istifadə edilən analitik texnikadır. Bradford və Lowry protein analizi kolorimetrik üsullarla işləyən iki növ protein analizidir. Həm Bradford, həm də Lowry protein analizləri məhluldakı protein konsentrasiyasını təyin edir. Bununla birlikdə, Bradford və Lowry Protein Assay arasındakı əsas fərq, istifadə etdikləri kolorimetrik texnikadadır. Bradford zülal analizi Coomassie parlaq mavi G-250 istifadə edir, Lowry protein analizi isə mis ionları (Cu+) ionları və Folin-Cioc alteu reagentindən istifadə edir. Bundan əlavə, Bradford metodu Lowry protein analizindən daha sürətli nəticələr verir. Bununla belə, hər iki üsul yüksək həssas üsullardır və müxtəlif maddələrin müdaxilələrinə məruz qalır.
