Elektroforez vs Elektroosmoz
Süzülmə, distillə, sütun xromatoqrafiyası kimi fiziki ayırma üsulları bəzi molekulların ayrılması zamanı asan üsul deyil. Elektroforez və elektroosmos yüklü hissəcikləri ayırmaq üçün istifadə edilə bilən digər iki ayırma üsuludur.
Elektroforez nədir?
Elektroforez molekulları ölçülərinə görə ayırmaq üsuludur. Bu ayrılmanın əsası molekulun yükü və onların elektrik sahəsində hərəkət etmək qabiliyyətidir. Bu, molekulyar biologiyada molekulları, xüsusilə DNT və zülalları ayırmaq üçün ən çox yayılmış və əsas texnikadır. Bu, əsasən istifadə olunur, çünki nisbətən asan və ucuzdur. Elektroforez aparatı bir qədər mürəkkəb ola bilər və onun hazırlanması bir az vaxt aparır. Amma laboratoriyada əlimizdə olan şeylərdən asanlıqla elektroforez aparatı düzəldə bilərik. Elektroforez üsulları məqsədlərimizdən asılı olaraq dəyişə bilər. DNT və ya zülalın ayrılması üçün bir ölçülü elektroforezdən istifadə edə bilərik. İki ölçülü elektroforez daha çox həll edilmiş nümunələr tələb olunduqda istifadə olunur (barmaq çapı vəziyyətində olduğu kimi). Molekulları ayırmaq üçün dəstəkləyici vasitə kimi gel istifadə olunur. Bu gel düz təbəqələr və ya borular şəklində hazırlana bilər. Bu prosedurun əsası, elektrik sahəsi verildikdə molekulların jel vasitəsilə hərəkət sürətindən asılı olaraq ayrılmasıdır. DNT kimi mənfi yüklü molekullar bu elektrik sahəsində müsbət qütbə doğru hərəkət edir, müsbət yüklü molekullar isə mənfi qütbə doğru hərəkət edirlər. Elektroforezdə agaroz və poliakrilamid kimi iki növ gel istifadə olunur. Bu ikisinin müxtəlif həlledici səlahiyyətləri var. Gel müxtəlif ölçülü molekulları süzmək üçün bir ələk rolunu oynayır. Geldə qurulmuş elektrostatik yüklər qüvvə rolunu oynayır.
Ayrılma ionların hərəkətliliyindən asılıdır.
F=fv=ZeE
V=ZeE/ f
F=hissəciyə təsir edən qüvvə
f=sürtünmə əmsalı
V=orta miqrasiya sürəti
Z=köç edən hissəciyin yükü
e=ibtidai ödəniş
E=elektrik sahəsinin gücü
Elektroforez üçün lazımi şərtlər nisbətən sadədir. Gel hazırlayarkən və nümunəni işə salarkən bir tampon istifadə olunur. Markerlər və boyalar vizuallaşdırma məqsədləri üçün istifadə olunur.
Elektro-osmos nədir?
Bu, tətbiq olunan elektrik sahəsindən istifadə edərək bir mayenin materialdan keçməsi prosesidir. Hərəkət məsaməli material vasitəsilə, kapilyar, membran və s. boyunca ola bilər. Bu, ayırma texnikası (xüsusilə kapilyar elektro-osmos) kimi istifadə edilə bilər. Mayenin sürəti tətbiq olunan elektrik sahəsi ilə xətti mütənasibdir. Bu, həmçinin kanalın qurulması üçün istifadə olunan materialdan və istifadə olunan həlldən asılıdır. İnterfeysdə məhlul və material əks yüklər əldə etmişdir və bu ikiqat elektrik təbəqəsi kimi tanınır. Məhlula elektrik sahəsi tətbiq edildikdə, ikiqat elektrik təbəqəsi yaranan Coulomb qüvvəsi ilə hərəkət edir. Bu elektro-osmotik axın kimi tanınır.
Elektroforez və Elektro-osmos arasındakı fərq nədir?
• Elektroforezdə bərk hissəciklər (nuklein turşuları və ya zülallar kimi makromolekullar) elektrik sahəsindən istifadə edərək hərəkətə gətirilir. Lakin elektroosmosda maye hərəkət edir.
• Elektroforezdə dəstəkləyici bərk material geldir. Lakin o, elektro-osmoz, gel, membran, kapilyar və s. ola bilər.
