Elisa və Elispot arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, Elisa ifraz olunan siqnal zülallarının ümumi konsentrasiyasını təyin edən fermentlə əlaqəli immunosorbent analizdir, Elispot isə fərdi sitokin ifraz edən hüceyrələri aşkarlayan fermentlə əlaqəli immunosorbent analizdir.
Elisa və Elispot tibb, bitki patologiyası, biotexnologiya və müxtəlif əczaçılıq sənayelərində geniş istifadə olunan iki fermentlə əlaqəli immunosorbent analizdir. Bu üsullarda bir protein analiti ona qarşı yönəldilmiş antikor tərəfindən aşkar edilir. Elisa laboratoriyalarda istifadə edilən ən məşhur fermentlə əlaqəli immunosorbent analizidir. Digər tərəfdən, Elispot, Elisa əvəzinə istifadə edilməyən, lakin laboratoriyalarda Elisa'ya əlavə olaraq istifadə edilən fermentlə əlaqəli bir immunosorbent analizidir.
Elisa Assay nədir?
Elisa ifraz olunan siqnal zülallarının ümumi konsentrasiyasını təyin edən fermentlə əlaqəli immunosorbent analizdir. Bu, ilk dəfə 1971-ci ildə Engvall və Perlmann tərəfindən təsvir edilən geniş istifadə edilən analitik biokimya analizidir. Bu texnika bu spesifik zülala qarşı yönəlmiş antikorlardan istifadə edərək maye nümunədə spesifik zülalın mövcudluğunu aşkar etmək üçün bərk fazalı ferment immunoassay növündən istifadə edir. Bu analiz tibb, bitki patologiyası və biotexnologiyada çox istifadə edilən diaqnostik vasitədir.
ELISA Testinin Mexanizmi
ELISA testinin əksəriyyətində naməlum miqdarda antigen başlanğıcda bərk dayağa (mikrolitr boşqab) hərəkətsizləşdirilir. Sonra uyğun əsas antikor bərk dəstək səthinə tətbiq olunur. Bu antikor antigenlə (antigen-antikor kompleksi) kompleks əmələ gətirir. Antigenlə əlaqəli əsas antikor biokonjuqasiya yolu ilə fermentlə əlaqəli ikincil antikor tərəfindən aşkar edilə bilər. Elisa testinin son mərhələsində fermentin substratını ehtiva edən bir maddə əlavə edilir. Birincil antikorun antigenə düzgün bağlanması varsa, substrat tərəfindən aşkar edilə bilən bir rəng dəyişikliyi yaranır. Nəhayət, bu, nümunədəki antigenin miqdarını təyin edir.
Şəkil 01: Elizanın Fərqli Növləri
Bundan başqa, Elizaya birbaşa Elisa və dolayı Elisa kimi müxtəlif yanaşmalar var. Hal-hazırda, Mycobacterium tuberculosis, rotavirus, hepatit B virus, hepatit C virusu, enterotoksin istehsal edən E.coli, HİV və SARS-CoV-2 kimi insan patogenlərini aşkar etmək üçün müxtəlif Elisa testlərindən istifadə olunur.
Elispot Təhlili nədir?
Elispot fərdi sitokin ifraz edən hüceyrələri aşkarlayan fermentlə əlaqəli immunosorbent analizdir. Cecil Czerkinsky ELISpot-u ilk dəfə 1983-cü ildə təsvir etmişdir. Bu, tək bir hüceyrə üçün sitokin ifrazının tezliyinin kəmiyyətcə ölçülməsinə yönəlmiş bir analiz növüdür. O, həmçinin bioloji və ya kimyəvi protein analitini aşkar etmək üçün antikorlardan istifadə edən bir texnika kimi təsnif edilir. Fluorospot analizi çoxlu analiti (daha məxfi zülallar) analiz etmək üçün flüoresandan istifadə edən Elispot analizinin variasiyasıdır.
Elispot Testinin Mexanizmi
Bu mexanizmdə ilkin olaraq mikrolitr plitələrin quyularına sitokinə spesifik monoklonal antikorlar əlavə edilir. Sonra müşahidə olunan istənilən hüceyrələr quyulara əlavə edilir. Daha sonra hüceyrələr inkubasiya edilir. Hüceyrə inkubasiyası zamanı hüceyrələrə istənilən stimullara reaksiya verməyə və sitokin ifraz etməyə icazə verilir. İnkubasiya edilmiş hüceyrələr tərəfindən ifraz olunan sitokinlər antikorlara yapışacaq, çünki hüceyrələr sitokinə spesifik monoklonal antikorlarla əhatə olunub.
Şəkil 02: Elispot Təhlili
Bu sitokinə spesifik monoklonal antikorları aşkar etmək üçün quyuya biotinləşdirilmiş spesifik aşkarlama antikorları əlavə edilir. Biotinləşdirilmiş spesifik aşkarlama antikorları quyularda sitokinə spesifik monoklonal antikorları tutur. Bundan əlavə, aşkarlayıcı antikorlarla bağlanmaq üçün streptavidin-ferment konjugatları quyulara əlavə olunur. Son mərhələdə quyulara xüsusi substratlar əlavə olunur. Enzim konjugatlarının və substratların reaksiyaları quyularda fərqli ləkələr əmələ gətirir. Bu fərqli ləkələr avtomatlaşdırılmış ELISpot oxuyucuda oxunur. Nəhayət, bu, sitokin ifrazının tezliyini daha da hesablayacaq.
Elisa və Elispot arasındakı oxşarlıqlar nələrdir?
- Onların hər ikisi fermentlə əlaqəli immunosorbent analizlərdir.
- Hər iki analiz spesifik protein analitlərini aşkar edir.
- Bu analizlər zülal analitlərini müəyyən etmək üçün xüsusi antikorlardan istifadə edir.
- Hər iki analizdə fermentlər və substratlar istifadə olunur.
- Onlar tibbi laboratoriyalarda diaqnostika vasitəsi kimi istifadə olunur.
Elisa və Elispot Arasındakı Fərq Nədir?
Elisa ifraz olunan siqnal zülallarının ümumi konsentrasiyasını təyin edən fermentlə əlaqəli immunosorbent analizdir. Digər tərəfdən, Elispot fərdi sitokin ifraz edən hüceyrələri ölçən fermentlə əlaqəli immunosorbent analizidir. Beləliklə, bu Elisa və Elispot arasındakı əsas fərqdir. Bundan əlavə, Elisa testində antigen əvvəlcə mikrolitr quyularına immobilizasiya edilir. Bunun əksinə olaraq, Elispot testində antikor əvvəlcə mikrolitr quyularına immobilizasiya edilir. Beləliklə, bu, Elisa və Elispot arasındakı başqa bir fərqdir.
Aşağıdakı infoqrafika cədvəl şəklində Elisa və Elispot arasındakı fərqin ətraflı təhlilini təqdim edir.
Xülasə – Elisa vs Elispot
Elisa və Elispot tibb, bitki patologiyası, biotexnologiya və müxtəlif əczaçılıq sənayelərində geniş istifadə olunan iki fermentlə əlaqəli immunosorbent analizdir. Elisa, ölçüləcək liqandın əleyhinə yönəlmiş antikorlardan istifadə edərək maye nümunədə liqandın (zülalın) varlığını aşkar edir. Elispot analizi immun cavabların monitorinqi üçün geniş istifadə olunan üsuldur. Antikorlardan istifadə edərək fərdi sitokin ifraz edən hüceyrələri aşkar edir. Bu həm immunoassay, həm də bioanaliz üsuludur. Beləliklə, bu, Elisa və Elispot arasındakı fərqin xülasəsidir.
