Gen gücləndirilməsi ilə gen klonlaşdırılması arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, genin gücləndirilməsi polimeraza zəncirvari reaksiya ilə in vitroda maraq doğuran genin çoxlu surətinin çıxarılması prosesidir. Lakin gen klonlaşdırılması rekombinant plazmid yaradaraq onu ana bakteriyaya çevirməklə maraq doğuran genin in vivo çoxlu surətinin çıxarılması prosesidir.
Gen bir proteini kodlayan DNT-nin spesifik fraqmentidir. Bir orqanizm minlərlə genə malikdir. Üstəlik, molekulyar bioloji üsullardan istifadə edərək mühüm genlərin DNT ardıcıllığını çox altmaq mümkündür. Gen gücləndirilməsi və gen klonlaşdırılması iki belə prosedurdur. Hər iki prosedur maraq doğuran genin çoxlu surətini çıxarır. Bununla belə, gen amplifikasiyası ilə gen klonlaması arasında metodologiya baxımından fərq var.
Gen Amplification nədir?
Gen gücləndirilməsi polimeraza zəncirvari reaksiyasından istifadə edərək müəyyən bir genin surətinin çıxarılması prosesidir. Bir geni gücləndirmək üçün müvafiq DNT ekstraksiya protokolundan istifadə edərək həmin orqanizmin DNT-si çıxarılmalıdır. Sonra ayrılmış tək zəncirləri əldə etmək üçün ekstraksiya edilmiş ikiqat zəncirli DNT denatürasiya edilməlidir. Növbəti addım, maraq doğuran genin surətlərini çıxarmaq üçün PCR reaksiyasından istifadə etməyi əhatə edir. Bundan əlavə, PCR qarışığı tələb olunan primerləri, nukleotidləri, DNT polimeraza fermentini, şablon DNT və digər inqrediyentləri ehtiva edir. ÇXR proqramının sonunda maraq geninin gücləndirilməsi baş verir.
Şəkil 01: Gen Gücləndirilməsi
Bundan başqa, gen gücləndirilməsi spesifik ardıcıllığın aşkar edilməsində, orqanizmin identifikasiyasında, xəstəliklərin diaqnostikasında və gen kitabxanalarının yaradılmasında və s.-də ilkin addımdır.
Gen Klonlama nədir?
Gen klonlaşdırılması, gen kitabxanaları yaratmaq və ya maraq doğuran genin çoxlu surətlərini çıxarmaq üçün gen mühəndisliyində bir üsuldur. Bu proses rekombinant plazmidin yaradılmasını və rekombinant plazmidin ev sahibi hüceyrəyə, xüsusən də bakteriya hüceyrəsinə çevrilməsini əhatə edir. Klon orijinal orqanizmin və ya molekulun eyni surətidir. Gen klonlaması minlərlə gen klonunu yarada bilər.
Şəkil 02: Gen Klonlaması
Maraqlanan gen müəyyən edildikdən sonra, onu xüsusi məhdudlaşdırıcı fermentlərlə məhdudlaşdıraraq, müəyyən bir orqanizmin genomundan ayırmaq olar. Sonra eyni məhdudlaşdırıcı fermentdən istifadə edərək, gen fraqmentini daxil etmək üçün plazmidlər (vektorlar) açılmalıdır. Sonra rekombinant plazmid elektroporasiya kimi müxtəlif üsullardan istifadə edərək ev sahibi bakteriyaya çevrilir. Rekombinant plazmidlərin bəziləri ev sahibi bakteriya hüceyrələrinə daxil olur. Bir antibiotik istifadə edərək, transformasiya edilmiş bakteriyalar seçilə, təcrid oluna və təzə mühitdə becərilə bilər. Beləliklə, bu texnika milyonlarla gen klonunu əldə etməyə kömək edir.
Genlərin gücləndirilməsi və gen klonlanması arasında hansı oxşarlıqlar var?
- Gen gücləndirilməsi və gen klonlaşdırılması iki molekulyar bioloji texnikadır.
- Bu texnikanın hər ikisində müəyyən bir DNT ardıcıllığı və ya gen milyonlarla və ya minlərlə dəfə çoxalır.
- Üstəlik, hər iki texnika bir çox elmi sahələr üçün böyük əhəmiyyət kəsb edir.
Genlərin gücləndirilməsi ilə gen klonlanması arasındakı fərq nədir?
Gen amplifikasiyası PCR adlı in vitro metoddan istifadə edərək müəyyən bir genin surətini çıxaran prosesdir. Digər tərəfdən, gen klonlaması, rekombinant vektorların qurulması və canlı orqanizmdə çoxaldılması yolu ilə in vivo metoddan istifadə edərək müəyyən bir genin surətlərini çıxaran bir prosesdir. Beləliklə, bu, gen gücləndirilməsi ilə gen klonlanması arasındakı əsas fərqdir. Bundan əlavə, gen gücləndirilməsi cəmi bir neçə saat çəkir, gen klonlaması isə bir neçə gün çəkir. Buna görə də bunu gen gücləndirilməsi ilə gen klonlaması arasındakı fərq kimi də nəzərdən keçirə bilərik. Üstəlik, gen gücləndirmə prosesi daha az səhv, gen klonlama prosesi isə daha çox səhv göstərir.
Aşağıdakı infoqrafika genin gücləndirilməsi ilə gen klonlanması arasındakı fərqi ümumiləşdirir.
Xülasə – Gen Gücləndirilməsi və Gen Klonlanması
Gen gücləndirilməsi in vitro şəraitdə polimeraza zəncirvari reaksiyasından istifadə edərək arzu olunan genin surətlərinin çıxarılması prosesidir, gen klonlaması isə rekombinant DNT molekulu və canlı orqanizm/ev sahibi istifadə edərək maraq doğuran genin surətlərinin çıxarılması prosesidir. bakteriya. Beləliklə, bu, gen gücləndirilməsi və gen klonlanması arasındakı əsas fərqdir.
