Əsas Fərq – HPLC vs HPTLC
HPLC və HPTLC arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, HPLC nümunədəki komponentlərin kəmiyyətcə ayrılmasına imkan verir, HPTLC isə nümunədəki komponentlərin kəmiyyətcə ayrılmasına imkan vermir.
Xromatoqrafiya qarışıqdakı komponentləri ayırmaq və müəyyən etmək üçün istifadə edilən fiziki ayırma üsuludur. Həm HPLC, həm də HPTLC xromatoqrafik üsullardır. HPLC yüksək performanslı maye xromatoqrafiyasıdır. HPTLC yüksək performanslı nazik təbəqə xromatoqrafiyasıdır.
HPLC nədir?
HPLC yüksək performanslı maye xromatoqrafiyasıdır. Qarışıqdakı komponentləri ayırmaq, müəyyən etmək və kəmiyyətini təyin etmək üçün istifadə olunan analitik texnikadır. Bu texnikada nümunə uyğun bir həlledicidə həll edilir. Sonra nümunə ilə həlledici müəyyən təzyiqə malik nasosdan keçirilir. Nasos bərk adsorbent materialla doldurulur. Sonra bəzi komponentlər uducu materiala güclü şəkildə bağlanır, digər komponentlər isə sərbəst bağlanır. Bu, komponentlərin nasosdan fərqli axın sürətinə malik olmasına səbəb olur. Beləliklə, komponentlər asanlıqla ayrıla bilər.
Şəkil 01: HPLC Sistemi
Pompanı dolduran adsorbent material stasionar faza kimi tanınır. Həll edilmiş nümunə ilə həlledici mobil faza kimi tanınır. Bu texnikada istifadə olunan nasos sütun adlanır. Sütun adsorbent materialla, ən çox silisium hissəcikləri ilə doldurulur. Bu hissəciklərin ölçüsü 2-50 μm arasında dəyişə bilər. Ayrılma prosesinə mobil fazanın tərkibi və sistemin temperaturu təsir edir. Nümunədəki stasionar faza ilə komponent arasındakı qarşılıqlı təsirlər hidrofobik qarşılıqlı təsirlər, dipol-dipol qarşılıqlı təsirləri, ion bağları və s. ola bilər.
HPLC-nin işləmə təzyiqi ənənəvi maye xromatoqrafiyasından xeyli yüksəkdir. 50-350 bar ətrafında yerləşir. Maye xromatoqrafiya ilə HPLC arasındakı fərq ondan ibarətdir ki, maye xromatoqrafiyada nümunə çəkisi altında sütundan düşür, HPLC-də isə nümunə sütun vasitəsilə təzyiq altında olur. Ənənəvi maye xromatoqrafiyası ilə müqayisədə sütunun və uducu hissəciklərin ölçüsü də çox kiçikdir. Bununla belə, HPLC texnikası ilə verilən ayırdetmə daha üstündür.
HPTLC nədir?
HPTLC yüksək performanslı nazik təbəqə xromatoqrafiyasıdır. Bu, ənənəvi TLC-nin təkmil və avtomatlaşdırılmış formasıdır. Bu texnika qısa müddətdə effektiv həlli təmin edir. Bu analiz metodunda nümunə və istinad eyni vaxtda təhlil edilə bilər ki, bu da nümunəni istinadla müqayisə etməyə imkan verir. Bu, digər xromatoqrafik üsullardan daha yaxşı analitik dəqiqlik verir. Təhlil üçün ayrılan vaxt daha azdır. Texnika aşağı qiymətli texnikadır.
Şəkil 02: HPTLC istifadə edərək qida boyalarının təhlili
HPTLC metodu sadə prosesdir və nümunənin hazırlanması mərhələsi də aradan qaldırılır (Ənənəvi TLC-də nümunə hazırlama mərhələsi ayrılmadan əvvəl daxil edilir. Bu addım təmizləmə və zənginləşdirməni nəzərdə tutur). Solvent heç bir ilkin müalicə olmadan birbaşa istifadə edilə bilər, baxmayaraq ki, digər xromatoqrafik üsullar deqazasiya, filtrasiya və s. kimi ilkin müalicələri tələb edir.
HPTLC-də istifadə edilən adsorbent material çox kiçik hissəcik ölçülərinə malik silisiumdur. Ənənəvi TLC-də silisiumun hissəcik ölçüsü 5-20 μm, HPTLC-də isə 4-8 μm-dir. Nümunə aplikatordan istifadə edərək HPTLC plitəsinə tətbiq olunur. Vahid və təhlükəsiz bir tətbiq təmin edir. Sonra plitələr mobil faza olan bir kameraya yerləşdirilir. Kamera mobil fazanın buxarı ilə doymuş olmalıdır. HPTLC prosesindən sonra hərəkət edən ləkələr aşkarlana bilər. Lövhədəki ləkələri aşkar edərkən HPTLC texnikası uyğun UV bölgəsindən və ya yod kamerasından istifadə edir.
HPLC ilə HPTLC arasındakı fərq nədir?
HPLC vs HPTLC |
|
| HPLC yüksək performanslı maye xromatoqrafiyasıdır. | HPTLC yüksək performanslı nazik təbəqə xromatoqrafiyasıdır. |
| Texnika | |
| HPLC-də həlledici ilə mobil faza stasionar faza ilə doldurulmuş sütundan keçirilir. | HPTLC-də nümunə TLC boşqabında qeyd olunur və mobil faza olan kameranın içərisinə yerləşdirilir; sonra nümunənin mobil faza ilə birlikdə boşqabdan yuxarıya doğru hərəkət etməsinə icazə verilir. |
| Ölçmə | |
| HPLC-də nümunədəki komponentləri ayırmaq üçün sütundakı komponentlərin axın sürətləri arasındakı fərqlərdən istifadə edilir. | HPTLC-də nümunədəki hər bir komponentin qət etdiyi məsafələr arasındakı fərqlər nümunədəki komponentləri ayırmaq üçün istifadə olunur. |
| Kəmiyyət Ayrılığı | |
| HPLC nümunədəki komponentlərin kəmiyyətcə ayrılmasına imkan verir. | HPTLC nümunədəki komponentlərin kəmiyyətcə ayrılmasına icazə vermir. |
Xülasə – HPLC vs HPTLC
HPLC və HPTLC iki xromatoqrafik üsuldur. HPLC və HPTLC arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, HPLC nümunədəki komponentlərin kəmiyyətcə ayrılmasına imkan verir, HPTLC isə nümunədəki komponentlərin kəmiyyətcə ayrılmasına imkan vermir.
