HPLC ilə sürətli HPLC arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, HPLC üçün istifadə etdiyimiz nasos təzyiqi təxminən 40 MPa, sürətli HPLC üçün nasos təzyiqi isə 3-5 MPa civarındadır.
Bir qarışığın komponentlərini ayırmaq üçün istifadə etdiyimiz ən geniş yayılmış üsul “maye xromatoqrafiyasıdır”. Bu məqsədə çatmaq üçün HPLC çox məşhur olan bir neçə üsul var. HPLC, maye qarışığın komponentlərini sürətli və səmərəli şəkildə müəyyən edən, kəmiyyətini təyin edən və ayıran Yüksək Performanslı Maye Xromatoqrafiya deməkdir. Fast HPLC HPLC-nin xüsusi tətbiqidir və son vaxtlar həllərin öyrənilməsi ilə məşğul olanların diqqətini cəlb edir.
HPLC nədir?
HPLC yüksək performanslı maye xromatoqrafiyasıdır. Həllediciləri bir sütundan keçmək üçün itələmək üçün yüksək təzyiqdən istifadə edir. Həmçinin, amin turşuları, nuklein turşuları, karbohidratlar, steroidlər, antibiotiklər və karbohidrogenlər kimi müxtəlif birləşmələri ayırmaq və öyrənmək üçün ideal bir yoldur. HPLC daha yüksək ayırdetmə və daha sürətli analiz kimi qarışıqların ayrılması üçün digər üsullarla müqayisədə bir çox üstünlüklərə malikdir. O, yenidən qablaşdırma və regenerasiya ehtiyacını aradan qaldırır və parametrlərə daha yaxşı nəzarət edir və beləliklə, ayırmanın səmərəliliyini artırır. İdeal olaraq, HPLC böyük miqyaslı tətbiqlər üçün uyğundur, çünki o, çox kiçik hissəcikləri ayıra bilir və həlledicilərin asanlıqla axmasını asanlaşdıran yüksək təzyiqlərdən istifadə etməyə imkan verir.
Şəkil 01: HPLC Sütunu
Qısaca, HPLC texnikasının işləmə üsulu aşağıdakı kimidir. Birincisi, nümunəni nasosdan istifadə edərək diskret kiçik miqdarda mobil faza axınına daxil etməliyik. Pompanın təzyiqi 40 MPa səviyyəsində saxlanılmalıdır. Mobil fazanın bu axını HPLC sütunundan keçir. Sonra nümunədəki komponentlər də sütundan keçir. Bununla belə, onların hərəkət sürətləri bir-birindən nümunə komponentləri ilə sütunun daxilindəki adsorbent arasında qarşılıqlı təsir fərqinə görə fərqlənir. Biz bu adsorbenti stasionar faza adlandırırıq, çünki o, sütunun içərisində yerləşir (hərəkət etmir). Sonra sütunun sonunda sütundan ayrılan nümunəni toplaya bilərik və bununla da nümunədəki komponentləri ayrıca toplaya bilərik.
Fast HPLC nədir?
Bu yaxınlarda Schering Plow elmi-tədqiqat institutunun tədqiqatçı alimləri HPLC-nin təkmil versiyası olan sürətli HPLC texnikasını işləyib hazırladılar, çünki bu, qarışıqdan birləşmələrin daha da sürətlə ayrılmasına imkan verir. Həmçinin, sürətli HPLC kimi tanınan bu texnika bərk silisium hissəcikləri üzərində 0,5 um məsaməli silisium əritməklə hazırlanan 2,7 um əridilmiş əsas silisium hissəciklərindən istifadə edir. Bu unikal şəkildə hazırlanmış hissəciklər, HPLC-də istifadə etdiyimizdən daha aşağı əks təzyiq altında ayrılma prosedurunu çox sürətli edir.
Şəkil 02: FPLC Aparatı
Fast HPLC UPLC ilə müqayisə edilə bilən nəticələr əldə edir, lakin elm adamları bu texnikanın üstün olduğunu düşünürlər, çünki çox bahalı ultra yüksək təzyiqli avadanlıq tələb etmir. Ən yaxşısı odur ki, sürətli HPLC heç bir yeni laboratoriya protokolu tələb etmir.
HPLC ilə Sürətli HPLC arasındakı fərq nədir?
HPLC yüksək performanslı maye xromatoqrafiyasıdır və sürətli HPLC yüksək performanslı maye xromatoqrafiyasının inkişaf etmiş formasıdır. HPLC və sürətli HPLC arasındakı əsas fərq, HPLC üçün istifadə etdiyimiz nasos təzyiqinin təxminən 40 MPa olmasıdır. Halbuki, sürətli HPLC üçün nasos təzyiqi 3-5 MPa civarındadır. Bundan əlavə, biz HPLC texnikasından istifadə edərək amin turşuları, nuklein turşuları, karbohidratlar, steroidlər, antibiotiklər və karbohidrogenlər kimi müxtəlif birləşmələri ayıra bilərik, halbuki sürətli HPLC texnikası əsasən zülalların ayrılması üçün istifadə olunur.
Aşağıdakı infoqrafika HPLC və sürətli HPLC arasındakı fərq haqqında daha çox məlumat təqdim edir.
Xülasə – HPLC vs Fast HPLC
HPLC bütün dünyada çox populyarlaşan maye xromatoqrafiya texnikasıdır. Fast HPLC HPLC-nin yeni versiyasıdır, Schering Plow İnstitutunun tədqiqatçı alimləri bu yeni texnikanı inkişaf etdirdilər. HPLC və sürətli HPLC arasındakı əsas fərq, ayırma üçün istifadə etdiyimiz nasos təzyiqinə əsaslanır. Yəni; HPLC üçün istifadə etdiyimiz nasos təzyiqi təxminən 40 MPa-dır. Lakin, sürətli HPLC üçün nasos təzyiqi 3-5 MPa civarındadır.
