HEK293 və HEK293t arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, HEK293, kəsilmiş insan adenovirus növü 5DNA ilə transfeksiya edilmiş embrion insan böyrəyindən əldə edilən ölümsüzləşdirilmiş hüceyrə xəttidir, HEK293t isə HEK293 orijinal hüceyrə xəttindən əldə edilən qız hüceyrə xəttidir. replikasiya mənşəli SV40 daşıyan plazmid vektoru ilə transfeksiya edilmişdir.
Transfeksiya adətən genotip və fenotipinə təsir etmək üçün hüceyrələrə yad DNT və RNT-nin daxil edilməsi prosesi kimi müəyyən edilir. Müxtəlif bioloji, kimyəvi və fiziki üsullarla yad nuklein turşularının bu cür tətbiqi hüceyrənin xüsusiyyətlərini dəyişə bilər. Nəhayət, bu, hüceyrə kontekstində gen funksiyasının və zülal ifadəsinin öyrənilməsinə imkan verir. HEK293 və HEK293t transfeksiyaya meylli olduqları üçün uzun illər hüceyrə biologiyası tədqiqatlarında geniş şəkildə istifadə edilən iki hüceyrə xəttidir.
HEK293 nədir?
HEK293 çoxlu rekombinant zülallar istehsal etmək üçün kəsilmiş insan adenovirus növü 5DNT ilə transfeksiya edilən embrion insan böyrəyindən əldə edilən ölümsüzləşdirilmiş hüceyrə xəttidir. HEK293s ilk olaraq 1973-cü ildə holland bioloq Aleks Van der Eb tərəfindən insan böyrək hüceyrələrindən təcrid edilmişdir. Bu hüceyrələr qadın dölün toxuma mədəniyyətində yetişdirilmişdir. Daha sonra Van der Eb laboratoriyasında doktorluqdan sonrakı tədqiqatçı Frank Graham tərəfindən kəsilmiş insan adenovirus növü 5DNT ilə transfeksiya edildi. Bu hüceyrə xətti Frankın 293rd təcrübəsi olduğu üçün HEK293 adlandırıldı.
Şəkil 01: HEK293
Adenoviral genlərin HEK hüceyrə genomuna daxil edilməsi bu hüceyrələrə yüksək miqdarda rekombinant zülalları çox səmərəli şəkildə istehsal etməyə imkan verir. Bundan əlavə, adenoviral vektor CMV promotor bölgəsini ehtiva edir; deməli, bu səmərəliliyi daha da artırır. Bu hüceyrə xətti gen ifadəsi tədqiqatları üçün ev sahibi kimi istifadə edilmişdir. Bu hüceyrə xətti biotexnologiya sənayesi tərəfindən gen terapiyası üçün terapevtik zülallar istehsal etmək üçün də istifadə olunur.
HEK293t nədir?
HEK293t yüksək miqdarda rekombinant zülal istehsal etmək üçün replikasiya mənşəli SV40 daşıyan plazmid vektoru ilə transfeksiya edilən HEK293 orijinal hüceyrə xəttindən əldə edilən ikinci hüceyrə xəttidir. HEK293t SV40 böyük T antigeninin mutant versiyasını ifadə edən insan hüceyrə xəttidir. HEK293t, Mişel Karlosun Stenforddakı laboratoriyasında HEK29E hüceyrə xəttinin SV40 böyük T antigeninin temperatura həssas mutantını kodlayan plazmidlə stabil transfeksiyası vasitəsilə yaradılmışdır. Əvvəlcə 293/tsA1609neo adlanırdı. Bunun səbəbi, transfeksiyanın neomisin müqavimətini və SV40 böyük T antigeninin tsA 1609 allelinin ifadəsini təmin edən hüceyrə xətti yaratmaq üçün istifadə edilməsidir.
Şəkil 02: HEK293t
SV40 böyük T antigeninin mutant versiyasının ifadəsi sayəsində replikasiya mənşəli SV 40 ilə transfeksiya edilmiş plazmidlər rekombinant zülalın miqdarını xeyli artıra bilər. Bu hüceyrə xətti biotexnoloji sənayedə zülal ifadəsi və rekombinant retrovirusların istehsalı üçün adətən istifadə olunur.
HEK293 və HEK293t arasında hansı oxşarlıqlar var?
- HEK293 və HEK293t transfeksiyaya meylli olduqları üçün hüceyrə biologiyası tədqiqatlarında geniş şəkildə istifadə edilən iki hüceyrə xəttidir.
- Hər iki hüceyrə xətti laboratoriyadan əldə edilmişdir.
- Bu hüceyrə xətləri rekombinant zülal istehsalının miqdarını əhəmiyyətli dərəcədə artıra bilər.
- Onlar insan embrion böyrək hüceyrələrinin plazmid vektoru ilə transfeksiya edilməsi yolu ilə hazırlanır.
HEK293 və HEK293t arasındakı fərq nədir?
HEK293 kəsilmiş insan adenovirus növü 5DNT ilə transfeksiya edilmiş embrion insan böyrəyindən əldə edilən ölümsüzləşdirilmiş hüceyrə xəttidir. Bunun əksinə olaraq, HEK293t, SV40 replikasiya mənşəyini daşıyan plazmid vektoru ilə transfeksiya edilmiş HEK293 orijinal hüceyrə xəttindən əldə edilən qız hüceyrə xəttidir. Beləliklə, bu HEK293 və HEK293t arasındakı əsas fərqdir. Bundan əlavə, HEK293 SV40 böyük T antigeninin mutant versiyasını ifadə etmir. Digər tərəfdən, HEK293t SV40 böyük T antigeninin mutant versiyasını ifadə edir.
Aşağıdakı infoqrafika yan-yana müqayisə üçün HEK293 və HEK293t arasındakı fərqləri cədvəl şəklində sadalayır.
Xülasə – HEK293 vs HEK293t
HEK293 və HEK293t davamlı böyüməsi və transfeksiyaya meylli olduqları üçün hüceyrə biologiyası tədqiqatlarında geniş şəkildə istifadə edilən iki hüceyrə xəttidir. HEK293 kəsilmiş insan adenovirus növü 5DNT ilə transfeksiya edilmiş embrion insan böyrəyindən əldə edilən ölümsüzləşdirilmiş hüceyrə xəttidir, HEK293t isə SV40 replikasiya mənşəyini daşıyan plazmid vektoru ilə transfeksiya edilmiş HEK293 orijinal hüceyrə xəttindən əldə edilən qız hüceyrə xəttidir. Beləliklə, bu, HEK293 və HEK293t arasındakı fərqi ümumiləşdirir.
