Əsas Fərq – CFU vs MPN
Koloniya əmələ gətirən vahid (CFU) və Ən çox ehtimal olunan say (MPN) nümunələrdə mikroorqanizmləri sadalamaq üçün istifadə edilən iki üsuldur. Hər iki parametr su nümunələrində suyun keyfiyyətini və nəcis göstərici bakteriyalarını aşkar etmək üçün istifadə olunur. Koloniya əmələ gətirən vahid müəyyən bir nümunənin xüsusi həcmində və ya çəkisində canlı bakterial hüceyrələrin və ya göbələk hüceyrələrinin sayını sadalamaq üçün istifadə edilən ölçüdür. Bu parametr üçün standart vahid CFU/ml və ya CFU/g-dir. Ən çox ehtimal olunan rəqəm maye nümunəsində canlı bakteriya hüceyrələrinin sayını ölçmək üçün istifadə edilən başqa bir vahiddir. CFU ilə MPN arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, CFU bərk agar boşqabında böyüyən bakterial və göbələk koloniyalarından hesablanır, MPN isə maye mühitdə böyüyən canlı bakteriyalardan hesablanır.
CFU nədir?
Koloniya əmələ gətirən vahid (CFU) verilmiş nümunədə canlı bakterial və ya göbələk hüceyrələrinin sayını ölçən parametrdir. Koloniya əmələ gətirən vahidləri hesablayan üsul standart boşqab sayı adlanır. Aqar plitələrində görünən həyat qabiliyyətinə malik koloniyalar mayelər üçün nümunənin 1 ml-i üçün CFU (millilitrdə koloniya əmələ gətirən vahid) və ya bərk maddələr üçün nümunənin 1 q-ı üçün CFU (bir qram üçün koloniya əmələ gətirən vahid) kimi ifadə edilir.
Nümunədə CFU-nu ölçmək üçün istifadə edilən iki ümumi üsul var. Yayılmış boşqab üsulu və tökmə boşqab üsuludur. Bu iki üsul serial seyreltmə adlı texnika ilə dəstəklənir. Ardıcıl olaraq seyreltilmiş nümunələr agarın səthində sayıla bilən sayda koloniya əldə etməyə imkan verir. Nümunənin məlum həcmi agar boşqabının səthinə yayıla bilər və ya agar ilə qarışdırılaraq boşqaba tökülə bilər. Sonra boşqab inkubasiya edilir və yaranan koloniyalar sayılır. Koloniyaların sayı orijinal nümunədəki mikroorqanizmlərin sayına aiddir. Həddindən artıq koloniya və ya çox az koloniya göstərən lövhələr hesablamadan çıxarılır, çünki nəticələr həmin lövhələrdə statistik cəhətdən dəqiq olmaya bilər. Statistik olaraq, ən yaxşı diapazon agar boşqabında 30-300 koloniyadır. Buna görə də dəqiq saymaq üçün düzgün lövhələr seçilməlidir. Serial seyreltmə yuxarıdakı funksiya üçün həyata keçirilir.
Plitələrdəki canlı koloniyaların sayını hesabladıqdan sonra CFU/ml aşağıdakı tənlikdən istifadə etməklə hesablana bilər.
CFU hər ml orijinal nümunə üçün=boşqabdakı koloniyaların sayı X seyreltmə əmsalı
Qayılma əmsalı=(1/ Boşqabın durulması)
Məsələn, 10-4 seyreltmənin boşqabında 149 koloniya əldə etsəniz, o zaman orijinal nümunənin 1 ml-də bakteriya sayı aşağıdakı kimi hesablana bilər.:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 və ya 1490000
=1. 49 x 106
Şəkil 01: Koloniya Yaradan Vahid
MPN nədir?
Ən çox ehtimal olunan rəqəm CFU/ml-ə alternativ ölçüdür. MPN həmçinin maye nümunəsində canlı hüceyrələri təxmin edir. O, maye mədəniyyətdə böyüyən orqanizmləri hesablayır və əsasən bakterioloji üsuldur. Bu üsul xüsusilə bakteriya hüceyrələrinin aşağı konsentrasiyası olan nümunələr üçün faydalıdır; məsələn, süd, içməli su və s. MPN dəyəri 100 ml həcm üçün ifadə edilir. MPN ehtimal nəzəriyyəsinə əsaslanan statistik metoda əsaslanır. 100 ml nümunə üçün MPN dəyərlərini tapmaq üçün hazırlanmış statistik cədvəllər mövcuddur. Bu cədvəllər nəticələri 95% etibar limitində göstərir.
MPN dəyəri çox boru fermentasiya metodu adlanan texnika yerinə yetirildikdən sonra hesablanır. Tərkibində uyğun mədəniyyət mühiti olan üç dəst boru 10 ml, 1 ml və 0 kimi üç müxtəlif həcmdə nümunə ilə aşılanır.1 ml və böyüməsi üçün inkubasiya edilir. İnkubasiya dövründən sonra borular böyümənin olub-olmaması üçün + (müsbət) və ya – (mənfi) qiymətləndirilir. Müsbət və mənfi nəticələrin nümunəsi daha sonra mikroorqanizmlərin sayını qiymətləndirmək üçün statistik ehtimalların MPN cədvəli ilə müqayisə edilir. Sonra 100 ml nümunə üçün MPN dəyəri verilir. MPN su nümunələrində mövcud olan koliform bakteriyaları aşkar etmək üçün geniş istifadə olunur.
Şəkil 02: MPN cədvəli
CFU və MPN arasındakı fərq nədir?
CFU vs MPN |
|
| CFU müəyyən nümunədə canlı bakterial və ya göbələk koloniyalarının sayını ifadə etmək üçün istifadə edilən ölçüdür. | MPN CFU-ya alternativ ölçüdür və maye nümunəsində canlı bakterial hüceyrələrin sayını ölçür. |
| Vahid | |
| CFU/ml və ya CFU/g | MPN/100 ml |
| Hesablama | |
| CFU agar plitələrində yetişdirilən koloniyaların sayının hesablanması ilə hesablanır. | MPN boruların müsbət və mənfi nümunələrini MPN statistik cədvəli ilə müqayisə etməklə hesablanır. |
| Serial Seyreltmə Texnikası | |
| Serial seyreltmə nümunələri agar plitələrinə yerləşdirməzdən əvvəl həyata keçirilir. | MPN hesablanarkən seriyalı seyreltmə adətən həyata keçirilmir |
| Metodlar | |
| Yayılan boşqab üsulu və tökmə boşqab üsulu CFU əldə etmək üçün həyata keçirilən iki növ üsuldur. | Birdən çox boru fermentasiyası MPN dəyərini əldə etmək üçün həyata keçirilən üsuldur. |
Xülasə – CFU vs MPN
Mikrob artımının ölçülməsi bir çox səbəblərə görə tələb olunur. Qida emalı zavodlarında qidada olan mikroorqanizmlərin səviyyəsini və növünü ölçmək lazımdır. Qida sənayesində və tibbdə sterilizasiya müalicələrinin effektiv şəkildə tətbiq edilməsini təmin etmək lazımdır. Çirkab su təmizləyici qurğularda müntəzəm olaraq mikrobların hesablanması tələb olunur. Molekulyar biologiyada proseduru optimallaşdırarkən, plitələrdəki koloniyaların sayını ölçmək lazımdır. Beləliklə, müxtəlif sayma və böyümə ölçmə üsulları mövcuddur. CFU və MPN müxtəlif sahələrdə geniş tətbiq olunan iki belə üsuldur. CFU müəyyən bir nümunədə mövcud olan canlı bakterial və göbələk koloniyalarının sayının ölçüsüdür. Standart boşqab sayma metodu və ya etibarlı boşqab sayma üsulu ilə hesablanır. MPN maye nümunənin müəyyən həcmində mövcud olan bakteriya hüceyrələrinin sayını ifadə edən başqa bir ölçüdür. Çox boru fermentasiya üsulu və MPN cədvəlindən istifadə etməklə hesablanır. Bu, CFU və MPN arasındakı fərqdir.
CFU vs MPN-in PDF versiyasını endirin
Bu məqalənin PDF versiyasını yükləyə və sitat qeydlərinə uyğun olaraq onu oflayn məqsədlər üçün istifadə edə bilərsiniz. Lütfən, PDF versiyasını buradan yükləyin CFU və MPN arasındakı fərq.
