Əsas Fərq – Transformantlar və Rekombinantlar
Rekombinasiya və transformasiya gen mühəndisliyində iki mühüm addımdır, burada orqanizmin xüsusiyyətləri onun genetik materialını manipulyasiya etməklə bilərəkdən dəyişdirilir. Rekombinasiya yad DNT-nin vektor genomuna daxil edildiyi və rekombinant DNT molekulunun əmələ gəldiyi bir prosesdir. Transformasiya rekombinant molekulun ev sahibi orqanizmə daxil olduğu növbəti addımdır. Ev sahibi hüceyrə və ya orqanizm rekombinant molekulun ifadəsini asanlaşdırır. Transformantlar və rekombinantlar arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, transformantlar rekombinant molekulu içəriyə götürən və ifadəni asanlaşdıran hüceyrələr və ya orqanizmlərdir, rekombinantlar isə xarici DNT-nin genomuna daxil edilməsinə və ifadə üçün host transformantlarına nəqlinə imkan verən vektorlardır.
Transformantlar nədir?
Transformantlar ifadə üçün rekombinant DNT-nin götürüldüyü hüceyrələr və ya orqanizmlərdir. Bakteriyalar laboratoriya şəraitində böyümək, çoxalmaq və idarə etmək asan olduğundan və transformasiya prosesi digər orqanizmlərlə müqayisədə asan olduğundan gen mühəndisliyində ev sahibi orqanizm kimi istifadə olunur. Gen mühəndisliyində istifadə edilən ən məşhur ev sahibi bakteriya E coli bakteriyasıdır.
Transformasiya prosesi zamanı ev sahibi hüceyrələr rekombinantları qəbul etməyə təhrik edilir. Bununla belə, bəzi ev sahibi hüceyrələr rekombinant molekulları qəbul etmir. Onlar transformantlar kimi tanınır və içərisində rekombinant DNT molekulları olan hüceyrələr transformantlar kimi tanınır. Transformantların qeyri-transformantlardan seçilməsi molekulyar biologiyada seçilə bilən markerlərdən istifadə etməklə həyata keçirilir. Seçilə bilən markerlər DNT inserti ilə birlikdə vektor genomuna daxil edilir. Tez-tez istifadə edilən seçilə bilən markerlər antibiotiklərə davamlı genlərdir. Marker genlər transformantların diferensiallaşmasını asanlaşdırır və prosesi davam etdirir. Transformasiya prosesindən sonra bakteriya antibiotik tərkibli mühitdə yetişdirilir. Yalnız transformatorlar həmin mühitdə böyüməyə qadirdirlər, çünki onların daxilində rekombinantlar var.
Rekombinant DNT molekulu ev sahibi orqanizmin daxilində transformasiya edildikdən sonra yad DNT ya ev sahibi hüceyrə genomuna inteqrasiya oluna bilər, ya da sitoplazmada inteqrasiya olunmamış qala bilər. Bununla belə, yad DNT-nin ifadəsi və təkrarlanması ev sahibi orqanizmdə baş verir və prosesdən istənilən nəticəni verir.
Rekombinantlar nədir?
Rekombinant yad DNT ehtiva edən rekombinasiya edilmiş genomu olan orqanizm və ya hüceyrədir. Rekombinantlar gen mühəndisliyi prosesinin nəticəsidir. Maraqlanan genləri daxil edərək və genomu dəyişdirərək süni şəkildə in vitro şəkildə qurulurlar. Çox vaxt bakterial plazmidlər və bakteriofaqlar gen mühəndisliyində rekombinant rolunu oynayır. Müxtəlif DNT-lərin kimeralarına malikdir. Rekombinant DNT molekulu yad DNT-ni ev sahibi orqanizmə daşıyır və onu istənilən məhsulu ifadə edib formalaşdırır.
Rekombinant molekullar məhdudlaşdırıcı endonükleazlar və DNT ligazalarından istifadə etməklə qurulur. İstədiyiniz DNT fraqmenti orijinal orqanizmdən ayrılır və transformasiya üçün rekombinant etmək üçün vektora daxil edilir. Maraq geninin kəsilməsi və vektor orqanizmin açılması eyni məhdudlaşdırıcı fermentdən istifadə edilərək, onları birləşdirmək üçün uyğun yapışqan uçlar yaratmaq üçün aparılmalıdır. Xarici DNT vektor genomuna daxil edildikdən sonra o, rekombinant və ya rekombinant DNT molekulu kimi tanınır.
Şəkil 02: Rekombinant DNT
Transformantlar və Rekombinantlar arasındakı fərq nədir?
Transformantlar və Rekombinantlar |
|
| Transformantlar içərisində rekombinant DNT molekulu olan hüceyrələrdir. | Rekombinantlar öz genomuna yad DNT daxil edilmiş daşıyıcı molekullardır. |
| Xarici DNT-nin İfadesi | |
| Onlar rekombinant DNT-ni ifadə edə bilən ana hüceyrələrdir. | Onlar ev sahibi orqanizmdə özünü çoxalda bilməlidirlər. |
| Seçim | |
| Asanlıqla böyüyə və çoxala bilən hüceyrələr host hüceyrələr kimi seçilir. | Onlar asanlıqla çıxarıla bilən və seçilə bilən markerlərdən ibarət olmalıdır. |
Xülasə – Transformantlar və Rekombinantlar
Transformantlar içərisində rekombinant DNT molekulları olan hüceyrələr və ya orqanizmlərdir. Rekombinantlar genetik rekombinasiyaya uğramış və genomlarında yad DNT olan orqanizmlər və ya hüceyrələrdir. Bakterial hüceyrələr tez-tez transformasiya üçün ev sahibi hüceyrələr kimi istifadə olunur və plazmidlər və bakteriofaqlar tez-tez rekombinant DNT texnologiyasında vektor kimi istifadə olunur. Transformantlar və rekombinantlar arasındakı fərq budur.
