Əsas Fərq – Nitroselüloz vs Neylon Membran
Blotting molekulyar biologiyada onların qarışıqlarından DNT, RNT və zülalların spesifik ardıcıllığının aşkarlanması üçün vacib bir texnikadır. Blot adlanan membrandan istifadə etməklə həyata keçirilir. Şimal, cənub və qərb blotlama kimi müxtəlif ləkələmə üsulları var. Qeyri-spesifik bağlamanın və yanlış aşkarlamaların qarşısını almaq üçün ləkələmə prosesi üçün düzgün membranın seçilməsi diqqətlə aparılmalıdır. Nitroselüloz, neylon və PVDF blotting üsullarında çox istifadə olunan membranlardır. Onların fərqli xüsusiyyətləri var. Nitroselüloz və neylon membran arasındakı əsas fərq, nitroselüloz membranların yüksək protein immobilizasiya potensialına malik olmasıdır, neylon membranların isə yüksək nuklein turşusu immobilizasiya potensialı var. Bununla belə, hər iki növ membran tez-tez ləkələmə üsullarında istifadə olunur.
Nitroselüloz membran nədir?
Nitroselüloz membran nuklein turşusu və zülalların ləkələnməsi üsullarında geniş istifadə olunan membran filtridir. Yüksək protein bağlama potensialına malikdir. Beləliklə, nitroselüloz membranları western blotting texnikasında geniş istifadə olunur. Nitroselüloz membranlar bütün hibridləşdirmə üsullarına uyğundur və müdaxilələr olmadan üstün bağlama qabiliyyəti göstərir. Nitroselüloz membranları təbii olaraq hidrofilikdir. Onlar molekullarla hidrofilik qarşılıqlı əlaqə qurur və onları membrana effektiv şəkildə hərəkətsizləşdirir. Ticarət nitroselüloz membranları iki məsamə ölçüsündə mövcuddur: 0,45 və 0,2 µm.
Şəkil 01: western blottingdə istifadə edilən nitroselüloz membran
Neylon Membran nədir?
Neylon membran ləkələmə üsullarında istifadə edilən başqa bir ticari membran növüdür. Alternativ olaraq cənub və şimal ləkələri üçün nitroselüloz membranlarla istifadə olunur. Neylon membranlar DNT ilə birləşməyə yüksək yaxınlıqlarına görə nitroselülozdan daha cənub ləkələri üçün idealdır. Neylon membranların bir neçə unikal xüsusiyyətlərinə görə, tədqiqatçılar nitroselüloz membranın əvəzinə cənub və şimal ləkələri üçün neylon membranlardan istifadə edirlər. Neylon membranlar, həmçinin nitroselülozdan fərqli olaraq soyma və reprobasiya üçün tövsiyə olunur.
Şəkil 02: Southern blotting üçün istifadə olunan neylon membran
Nitroselüloz və Neylon Membran arasındakı fərq nədir?
Nitroselüloza vs Neylon Membran |
|
| Nitroselüloz membranları kövrəkdir. | Neylon membranlar daha az kövrəkdir. |
| İşləmə | |
| Onları idarə etmək çətindir. | Onları idarə etmək asandır. |
| Möhtəşəm | |
| Dəstəklənməyən nitroselüloz membranları yoxlamaq çətindir. | Neylon membranlarla reprobasiya etmək asandır. |
| Müxtəlif Saxlama Şərtləri ilə Uyğunluq | |
| Nitroselüloz membranları müxtəlif saxlama şəraitlərinə tab gətirmək üçün daha az gücə malikdir. | Neylon membranlar müxtəlif saxlama şəraitlərinə daha möhkəm cavab verir. |
| İstifadə edin | |
| Öncədən islatma tələb olunur. | Neylon membranlar üçün əvvəlcədən islatma tələb olunmur. |
| Hidrofilik Təbiət | |
| Nitroselüloz membranlar təbiətdə hidrofilikdir, lakin neylon membranlardan daha az hidrofilikdir. | Təbiətdə yüksək hidrofilikdirlər. |
| İmmobilizasiya Potensialı | |
| Nitroselüloz membranların nuklein turşularına daha az yaxınlığı var. Lakin onun zülallara yüksək yaxınlığı var. | Neylon membranlar nitroselüloz membranlara nisbətən nuklein turşuları ilə yüksək bağlanma potensialına malikdir. |
Xülasə – Nitroselüloza vs Neylon Membran
Nitroselüloz və neylon membranlar gel üzərində bantlama modelini yaratmaq üçün ləkələmə texnikasında istifadə olunan xüsusi təbəqələrdir. Qarışıqların membranda hərəkətsizləşdirilməsi ilə müəyyən ardıcıllığı və ya zülalları aşkar etmək imkanı verirlər. Molekullar membranda immobilizasiya edildikdən sonra, etiketli zondlarla hibridləşmə analizi üçün substrat kimi istifadə edilə bilər. Nitroselüloz membranı zülallarla yüksək bağlanma yaxınlığına görə western blotting texnikasında zülal aşkarlanması üçün geniş istifadə olunur. Neylon membranlar tez-tez cənub və şimal ləkələri üçün istifadə olunur. Bu nitroselüloz və neylon membran arasındakı fərqdir.
