Transformasiya vs Transfeksiya
Transformasiya və transfeksiya yad geni ana hüceyrəyə daxil etmək üçün istifadə edilən iki sadə üsuldur. Bununla belə, bu üsullar host və ya vektor sistemlərinin növündən asılıdır.
Hüceyrə çevrilməsi nədir?
Transformasiya genləri maya və bakteriya hüceyrələrinə daxil etmək üçün istifadə edilən texnikadır. Bu texnika adətən genlərdə irsi dəyişikliklərə səbəb olur və beləliklə, genin ifadəsi qalıcı olur. Bakterial transformasiya ilk dəfə 1928-ci ildə Frederik Qriffit tərəfindən təqdim edilmişdir. Sonra 1970-ci illərin əvvəllərində bu texnika E.coli. E. coli-nin transformasiyası prosesi zamanı hüceyrələr CaCl2-nin buz kimi soyuq məhlulunda isladılır. Bu addım E.coli hüceyrələrini bacarıqlı edir. Bundan sonra səlahiyyətli hüceyrələr plazmid DNT ilə qarışdırılır və 20-30 dəqiqə buz üzərində inkubasiya edilir. Sonra DNT-nin hüceyrəyə köçürülməsini təmin etmək üçün qısa bir istilik şoku verilir. Nəhayət, hüceyrələr qidalı bir bulyona yerləşdirilir və plazmidləri yaratmaq üçün 37 ° C-də 60-90 dəqiqə inkubasiya edilir. Bu addımlar uğurla tamamlandıqdan sonra transformasiya edilmiş hüceyrələr hüceyrələrin yayılması üçün uyğun mühitə yerləşdirilə bilər. Transformasiya səmərəsiz bir üsul hesab olunduğundan, klon bankların hazırlanmasında istifadə edilə bilməz.
Hüceyrə Transfeksiyası nədir?
Transfeksiya yad genin adətən məməlilərin hüceyrələrinə yeridilməsi üsuludur. Transfeksiyanın iki üsulu var; yəni keçici transfeksiya və stabil transfeksiya. Keçici transfeksiyada gen ifadəsi məhdud zaman üçün mövcuddur; beləliklə, genin dəyişməsi müvəqqəti ifadəyə səbəb olur. Bu transfeksiya üsulu sadə və sürətlidir; ona görə də müntəzəm olaraq istifadə edilə bilər. Keçici transfeksiyanın bir çatışmazlığı geniş miqyaslı zülal sintezi sistemləri üçün müraciətin çətinliyidir.
Sabit transfeksiya zamanı hədəf gen ev sahibi hüceyrənin genomuna inteqrasiya olunur və beləliklə, genin ifadəsi keçici transfeksiyadan fərqli olaraq qalıcıdır.
Transformasiya ilə Transfeksiya arasındakı fərq nədir?
• Transformasiya bir genin prokaryotik hüceyrəyə (bakterial və maya) daxil edilməsidir, transfeksiya isə adətən bir genin məməli hüceyrəsinə daxil edilməsi adlanır.
• Transformasiya genlərdə irsi dəyişikliklə nəticələnir, transfeksiya isə genlərdə müvəqqəti ifadə və ya daimi dəyişikliklərlə nəticələnə bilər.
