HPLC və UPLC arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, HPLC ölçüsü 5 mikrometr civarında olan hissəciklərin təhlilinə imkan verir, UPLC isə 2 mikrometrə yaxın daha kiçik hissəciklərə imkan verir.
HPLC və UPLC hər ikisi birləşmənin komponentlərini ayırmaqda faydalı olan Maye Xromatoqrafik üsullardır. HPLC və UPLC arasındakı fərqi bilmək üçün əvvəlcə HPLC-nin nə olduğunu bilməliyik. Bunun səbəbi, UPLC-nin HPLC-nin xüsusi versiyasıdır və HPLC-nin nə olduğunu bilsək, onu asanlıqla başa düşə bilərik.
HPLC nədir?
HPLC termini Yüksək Performanslı Maye Xromatoqrafiyası deməkdir. Bu, birləşmənin müxtəlif tərkib hissələrini ayırmaq üçün istifadə edə biləcəyimiz bir texnikadır. Həmçinin, qarışığın komponentlərini müəyyən etmək, kəmiyyətləndirmək və ayırmaq üçün ən çox istifadə edilən texnikadır. Bundan əlavə, bu üsul həllediciləri sütundan itələmək üçün yüksək təzyiqdən istifadə edir. Bundan əlavə, HPLC-nin əsas tətbiqləri birləşmənin tərkib hissələrinin təhlili üçün biokimyadadır. Bu, amin turşularının, nuklein turşularının, zülalların, karbohidrogenlərin, pestisidlərin, karbohidratların, antibiotiklərin, steroidlərin və saysız-hesabsız digər qeyri-üzvi maddələrin ayrılması və identifikasiyası üçün ideal bir yoldur.
Şəkil 01: Laboratoriyada HPLC Sistemi
Qısaca, HPLC texnikasının işləmə üsulu aşağıdakı kimidir. Birincisi, nümunəni nasosdan istifadə edərək diskret kiçik miqdarda mobil faza axınına daxil etməliyik. Pompanın təzyiqi 40 MPa səviyyəsində saxlanılmalıdır. Sonra mobil fazanın bu axını HPLC sütunundan keçir. Həmçinin, nümunədəki komponentlər sütundan keçir. Lakin onların hərəkət sürətləri bir-birindən fərqlidir. Bu fərq nümunə komponentləri ilə sütunun içərisindəki adsorbent arasındakı qarşılıqlı təsirlərin fərqinə görə yaranır. Biz bu adsorbenti stasionar faza adlandırırıq, çünki o, sütunun içərisində yerləşir (hərəkət etmir). İkincisi, sütunun sonunda sütundan ayrılan nümunəni toplaya bilərik. Orada nümunədəki hər bir komponent üçün saxlama müddətlərindəki fərqləri müəyyən edə bilərik.
UPLC nədir?
UPLC termini Ultra Yüksək Performanslı Maye Xromatoqrafiyası deməkdir. Bu, HPLC-nin bir variasiyasıdır, lakin əməliyyat üsulu eynidir. Lakin, HPLC-dən fərqli olaraq, bu üsul 2 mikrometrlik kiçik hissəciklər kimi çox kiçik hissəcikləri təhlil etməyə imkan verir.
Şəkil 02: UPLC Cihazı
Üstəlik, daha sürətli analiz təmin edir. Bu texnikada nümunənin sütuna daxil edilməsi üçün 100 MPa nasos təzyiqindən istifadə edirik. Beləliklə, bu yüksək təzyiq bütün nümunənin sütuna daxil olduğunu təsdiqləyir. Beləliklə, bu, HPLC ilə müqayisədə çox səmərəlidir.
HPLC və UPLC arasındakı fərq nədir?
HPLC termini Yüksək Performanslı Maye Xromatoqrafiya, UPLC termini isə Ultra Yüksək Performanslı Maye Xromatoqrafiya deməkdir. Buna görə də, UPLC texnikası HPLC-nin inkişaf etmiş bir versiyasıdır. Beləliklə, əməliyyat üsulu hər iki texnika üçün eynidir. Bununla belə, UPLC HPLC ilə müqayisədə daha səmərəlidir, çünki yüksək nasos təzyiqindən istifadə edir; HPLC üçün nasos təzyiqi 40 MPA, UPLC üçün isə 100 MPa-dır. Buna görə də, bu HPLC və UPLC arasındakı fərqdir. Hər şeydən əvvəl, HPLC və UPLC arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, HPLC ölçüsü təxminən 5 mikrometr olan hissəciklərin analizinə imkan verir, UPLC isə 2 mikrometrə yaxın daha kiçik hissəciklərə imkan verir.
Xülasə – HPLC vs UPLC
UPLC HPLC-nin formasıdır. Beləliklə, əməliyyat üsulları eynidir. Ancaq HPLC ilə müqayisədə UPLC-də bəzi təkmilləşdirilmiş xüsusiyyətlər tapa bilərik. Buna görə HPLC və UPLC arasında müəyyən fərq var. Bununla belə, HPLC və UPLC arasındakı əsas fərq ondan ibarətdir ki, HPLC ölçüsü təxminən 5 mikrometr olan hissəciklərin təhlilinə imkan verir, UPLC isə 2 mikrometr ətrafında daha kiçik hissəciklərə imkan verir.
